A. 溴酚藍指示劑剛配製好的是什麼顏色
溴酚藍指示劑是溴酚藍的氫氧化鈉溶液，黃色，在pH 3.0~4.6范圍，顏色由黃變藍。
B. 測定蛋白表面疏水性的溴酚藍溶液是用純水配製的嗎
妊娠中的雌性哺乳類，不僅其腦垂體前葉分泌促性腺激素，而且胎盤的絨毛膜也可分泌。後者即稱為絨毛膜促性腺（激）素。孕婦尿中的這種物質稱HCG，成分為糖蛋白，分子量約為30，000，等電點pH=2.95，由兩個亞基構成。有類似促黃體激素的作用，給動物以HCG後，幼小的小白鼠的卵巢即發育成熟，而家兔未交配即排卵。
C. 如何配置指示劑濃度的百里香酚藍溶液
將百里香酚藍100毫克溶於4.3毫升0.05MNaOH中研勻，用水稀釋至250毫升;或1克溶於1升20%酒精中。變色范圍PH1.2-2.8紅-黃;PH8.0-9.6黃-藍。
D. 溴酚藍指示劑配置時，使用少量的0.05mol/L的氫氧化鈉,配好後的溶液可以長期用棕色滴瓶盛裝嗎
只要密封性好是可以長期用棕色滴瓶盛裝的。
原則上，大量配好的溶液用試劑瓶儲藏比較好。
如果用量很小的話，不要一次配好了大量長期配置。
E. 如何配溴酚藍指示劑
1%的溴酚藍
將托盤天平上稱取1g溴酚藍定溶於100ml無水乙醇中，轉移入滴瓶中，貼標簽備用。
0.05%的溴酚藍
配western blot用的2*SDS上樣緩沖液需要用到0.1%的溴酚藍，2-DE中溴酚藍一般也是配成0.1%母液。實際上，溴酚藍在水中的溶解度不高，直接將0.1g溴酚藍溶於100ml水是有困難的。下面是其較合適的配製方法：
0.05%的溴酚藍配製方法：取溴酚藍0.1g，加0.05mol/L氫氧化鈉溶液3.0ml使溶解，再加水稀釋至200ml，即得。 變色范圍pH2.8～4.6（黃→藍綠）。只是不知道加入NaOH會不會影響2-DE實驗。估計影響不大，因為指示劑用量畢竟很少。
1%溴酚藍
加1g水溶性鈉型溴酚藍於100ml水中，攪拌或渦旋混合直到完全溶解。溴酚藍其鈉鹽易溶解在水裡。
F. 如何使用汞-溴酚藍法測定蛋白質的存在
汞－溴酚藍（mercury-bromophenol blue）法顯示蛋白質
配方：氯化汞1g；溴酚藍（bromophenol
blue）0.05g；2％醋酸水溶液100ml
方法：①材料用Carnoy、乙醇、甲醛、FAA等固定液固定（避免用鋨酸）。②將已脫蠟的切片復水，由100％→95％→85％→70％酒精→蒸餾水。③染色：將切片浸入汞－溴酚藍染色液中，室溫2h。④0.5％醋酸水溶液洗8min，以除去附著的染料。⑤流水沖洗。⑥叔丁醇脫水，二甲苯透明，加拿大樹膠封片。效果：蛋白質染成鮮藍色。
G. 求常用指示劑溶液的配置方法
實驗室常用酸鹼指示劑來檢驗物質的酸鹼性。其中遇酸性溶液邊紅色的指示劑是（石蕊）。
遇鹼性溶液變紅色的指示劑是（酚酞），既能檢驗物質的酸鹼性，又能檢驗物質的酸鹼性強弱的指示劑是（ph試紙）。
石蕊本身是紫色的，遇酸變紅，遇鹼變藍。
酚酞本身是無色的，遇酸不變色，遇鹼變紅。
H. 薄層色譜法中茚三酮、三氯化鋁、溴酚藍三種顯色劑怎麼配置呀 自己查了資料 但還是不敢肯定哈
選擇適當的展開劑是首要任務.一般常用溶劑按照極性從小到大的順序排列大概為：石油迷<己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇使用單一溶劑，往往不能達到很好的分離效果，往往使用混合溶劑通常使用一個高極性和低級性溶劑組成的混合溶劑，高極性的溶劑還有增加區分度的作用，常用的溶劑組合有：
Petroleumether/Ethylacetate,petroleumether/Acetone,Petroleumether/Ether,
Petroleumether/CH2Cl2, ethylacetate/MeOH,CHCl3/ethylacetate
展開劑的比例要靠嘗試.一般根據文獻中報道的該類化合物用什麼樣的展開劑，就首先嘗試使用該類展開劑，然後不斷嘗試比例，直到找到一個分離效果好的展開劑。展開劑的選擇條件：①對的所需成分有良好的溶解性；②可使成分間分開；③待測組分的Rf在0.2~0.8之間，定量測定在0.3～0.5之間；④不與待測組分或吸附劑發生化學反應；⑤沸點適中，黏度較小；⑥展開後組分斑點圓且集中；⑦混合溶劑最好用新鮮配製。
一般來說，弱極性溶劑體系的基本兩相由正己烷和水組成，再根據需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯來調節溶劑系統的極性，以達到好的分離效果，適合於生物鹼、黃酮、萜類等的分離；中等極性的溶劑體系由氯仿和水基本兩相組成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等來調節，適合於蒽醌、香豆素，以及一些極性較大的木脂素和萜類的分離；強極性溶劑，由正丁醇和水組成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等來調節，適合於極性很大的生物鹼類化合物的分離。
很多時候,展開劑的選擇要靠自己不斷變換展開劑的組成來達到最佳效果。
我們在實驗中，為了實現一個配體與其他雜質有效分離，曾經嘗試了很多種的溶劑組合，最後才找到石油醚—EtOAc—HCOOH（5.5：3.5：0.1）混合溶劑。一般把兩種溶劑混合時,採用高極性/低極性的體積比為1/3的混合溶劑,如果有分開的跡象,再調整比例（或者加入第三種溶劑）,達到最佳效果；如果沒有分開的跡象（斑點較「拖」），最好是換溶劑。對於在硅膠中這種酸性物質上易分解的物質，在展開劑里往往加一點點三乙胺，氨水，吡啶等鹼性物質來中和硅膠的酸性。（選擇所添加的鹼性物質，還必須考慮容易從產品中除去，氨水無疑是較好的選擇。）分離效果的好壞和所用硅膠和溶劑的質量很有關系：不同廠家生產的硅膠可能含水量以及顆粒的粗細程度，酸性強弱不同，從而導致產品在某個廠家的硅膠中分離效果很好，但在另一個廠家的就不行。溶劑的含水量和雜質含量對分離效果都有明顯的影響。溫度，濕度對分離效果影響也很明顯，在實驗中我們發現有時同一展開條件，上下午的Rf截然不同展開劑的選擇主要根據樣品的極性、溶解度和吸附劑的活性等因素來考慮在進行薄層層析時，首先應該知道未知化學成分的類型，其極性的大致歸屬，從提取液或從色譜柱的流動相極性可知，另外某樣品里含多種化學成分先按極性不同大致分，然後細分，對於分離未知的化學物質，展開劑的選擇也是一個摸索的過程，不應該僅僅從展開劑考慮，多因素綜合衡量！
溶劑：層析過程中溶劑的選擇，對組分分離關系極大。在柱層析時所用的溶劑（單一劑或混合溶劑）習慣上稱洗脫劑，用於薄層或紙層析時常稱展開劑。洗脫劑的選擇，須根據被分離物質與所選用的吸附劑性質這兩者結合起來加以考慮在用極性吸附劑進行層析時，當被分離物質為弱極性物質，一般選用弱極性溶劑為洗脫劑；被分離物質為強極性成分，則須選用極性溶劑為洗脫劑。如果對某一極性物質用吸附性較弱的吸附劑（如以硅藻土或滑石粉代替硅膠），則洗脫劑的極性亦須相應降低。
在柱層操作時，被分離樣品在加樣時可採用於法，亦可選一適宜的溶劑將樣品溶解後加入。溶解樣品的溶劑應選擇極性較小的，以便被分離的成分可以被吸附。然後漸增大溶劑的極性。這種極性的增大是一個十分緩慢的過程，稱為「梯度洗脫」，使吸附在層析柱上的各個成分逐個被洗脫。如果極性增大過訣（梯度太大），就不能獲得滿意的分離。溶劑的洗脫能力，有時可以用溶劑的介電常數（ε）來表示。介電常數高，洗脫能力就大。以上的洗脫順序僅適用於極性吸附劑，如硅膠、氧化鋁。對非極性吸附劑，如活性炭，則正好與上述順序相反，在水或親水住溶劑中所形成的吸附作用，較在脂溶性溶劑中為強。
3．被分離物質的性質：被分離的物質與吸附劑，洗脫劑共同構成吸附層析中的三個要素，彼此緊密相連。在指定的吸附劑與洗脫劑的條件下，各個成分的分離情況，直接與被分離物質的結構與性質有關。對極性吸附劑而言，成分的極性大，吸附住強。
當然，中草葯成分的整體分子觀是重要的，例如極性基團的數目愈多，被吸附的住能就會更大些，在同系物中碳原子數目少些，被吸附也會強些。總之，只要兩個成分在結構上存在差別，就有可能分離，關鍵在於條件的選擇。要根據被分離物質的性質，吸附劑的吸附強度，與溶劑的性質這三者的相互關系來考慮。首先要考慮被分離物質的極性。如被分離物質極性很小為不含氧的萜烯，或雖含氧但非極性基團，則需選用吸附性較強的吸附劑，並用弱極性溶劑如石油醚或苯進行洗脫。但多數中葯成分的極性較大，則需要選擇吸附性能較弱的吸附劑（一般Ⅲ～Ⅳ級）。採用的洗脫劑極性應由小到大按某一梯度遞增，或可應用薄層層析以判斷被分離物在某種溶劑系統中的分離情況。此外，能否獲得滿意的分離，還與選擇的溶劑梯度有很大關系。現以實例說明吸附層析中吸附劑、洗脫劑與樣品極性之間的關系。如有多組分的混合物，象植物油脂系由烷烴、烯烴、舀醇酯類、甘油三酸醋和脂肪酸等組份。當以硅膠為吸附劑時，使油脂被吸附後選用一系列混合溶劑進行洗脫，油脂中各單一成分即可按其極性大小的不同依次被洗脫。
又如對於C-27甾體皂甙元類成分，能因其分字中羥基數目的多少而獲得分離：將混合皂甙元溶於含有5％氯仿的苯中，加於氧化鋁的吸附柱上，採用以下的溶劑進行梯度洗脫。如改用吸附性較弱的硅酸鎂以替代氧化鋁，由於硅酸鎂的吸附性較弱，洗脫劑的極牲需相應降低，亦即採用苯或含5％氯仿的苯，即可將一元羥基皂甙元從吸附劑上洗脫下來。這一例子說明，同樣的中草葯成分在不同的吸附劑中層析時，需用不同的溶劑才能達到相同的分離效果，從而說明吸附劑、溶劑和欲分離成分三者的相互關系。
（二）簿層層析：薄層層析是一種簡便、快速、微量的層析方法。一般將柱層析用的吸附劑撒布到平面如玻璃片上，形成一薄層進行層析時一即稱薄層層析。其原理與柱層析基本相似。
1．薄層層析的特點：薄層層析在應用與操作方面的特點與柱層析的比較。
2．吸附劑的選擇：薄層層析用的吸附劑與其選擇原則和柱層析相同。主要區別在於薄層層析要求吸附劑（支持劑）的粒度更細，一般應小於250目，並要求粒度均勻。用於薄層層析的吸附劑或預制薄層一般活度不宜過高，以Ⅱ～Ⅲ級為宜。而展開距離則隨薄層的粒度粗細而定，薄層粒度越細，展開距離相應縮短，一般不超過10厘米，否則可引起色譜擴散影響分離效果。
3．展開劑的選擇：薄層層析，當吸附劑活度為一定值時（如Ⅱ或Ⅲ級），對多組分的樣品能否獲得滿意的分離，決定於展開劑的選擇。中草葯化學成分在脂溶性成分中，大致可按其極性不同而分為無極性、弱極性、中極性與強極性。但在實際工作中，
顯色劑：
碘：
適用於不飽和或者芳香族化合物
配製方法：在100ml 廣口瓶中，放入一張濾紙，少許碘粒。
或者在瓶中，加入10g 碘粒，30g 硅膠
高錳酸鉀
適用於含還原性基團化合物，比如羥基，氨基，醛
配製方法：1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH +
200mL 水. 使用期3 個月
磷鉬酸(PMA)
廣譜
配製方法：10 g of 磷鉬酸+100 mL 乙醇
紫外燈
適用於含共軛基團的化合物，芳香化合物
硫酸鈰：
生物鹼
配製方法：10%硫酸鈰(IV)+15%硫酸的水溶液
氯化鐵
苯酚類化合物
配製方法：1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.
桑色素(羥基黃酮)
廣譜, 有熒光活性
配製方法：0.1% 桑色素+甲醇
茚三酮
適用於氨基酸
配製方法：1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸
二硝基苯肼(DNP)
適用於醛和酮
配製方法：12g 二硝基苯肼+ 60mL 濃硫酸+ 80mL 水+ 200mL
乙醇
香草醛(香蘭素)
廣譜
配製方法：15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 濃硫酸
溴甲酚綠
適用於羧酸，pKa<=5.0
配製方法：在100ml 乙醇中，加入0.04g 溴甲酚綠，緩慢滴加0.1M的NaOH 水溶液，剛好出現藍色即至。
鉬酸鈰
廣譜
配製方法：235 mL 水+ 12 g 鉬酸氨+ 0.5 g 鉬酸鈰氨+ 15 mL
濃硫酸
茴香醛(對甲氧基苯甲醛)1
廣譜
配製方法：135 乙醇+ 5 mL 濃硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL
茴香醛，劇烈攪拌，使混合均勻.
茴香醛(對甲氧基苯甲醛)2
適用於萜烯，桉樹腦(cineoles), withanolides, 出油柑鹼(acronycine)
配製方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)經常需要利用溶劑的極性大小，對展開劑的極性予以調整
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I. 碘試液的配置
1、乙二胺四醋酸二鈉滴定液(0.05mol/L) C10H14N2Na2O8·2H2O=372.24
18.61g→1000ml
【配製】 取乙二胺四醋酸二鈉19g，加適量的水使溶解成1000ml，搖勻。
【標定】 取於約800℃灼燒至恆重的基準氧化鋅0.12g， 精密稱定，加稀鹽酸3ml使溶解，加水25ml，加0.025％甲基紅的乙醇溶液1滴，滴加氨試液至溶液顯微黃色，加水25ml與氨－氯化銨緩沖液(pH10.0)10ml， 再加鉻黑T指示劑少量，用本液滴定至溶液由紫色變為純藍色，並將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml乙二胺四醋酸二鈉滴定液 (0.05mol/L) 相當於4.069mg的氧化鋅。根據本液的消耗量與氧化鋅的取用量,算出本液的濃度，即得。
【貯藏】 置玻璃塞瓶中，避免與橡皮塞、橡皮管等接觸。
2、乙醇制氫氧化鉀滴定液(0.5mol/L) KOH=56.11
28.06g→1000ml
【配製】 取氫氧化鉀35g，置錐形瓶中，加無醛乙醇適量使溶解並稀釋成1000ml,用橡皮塞密塞，靜置24小時後，迅速傾取上清液，置具 橡皮塞的棕色玻瓶中。
【標定】 精密量取鹽酸滴定液(0.5mol/L)25ml，加水50ml稀釋後，加酚酞指示液數滴，用本液滴定。根據本液的消耗量，算出本液的濃度，即得。 本液臨用前應標定濃度。
【貯藏】 置橡皮塞的棕色玻瓶中，密閉保存。
3、四苯硼鈉滴定液(0.02mol/L) (C6H5)4BNa=342.22
6.845g→1000ml
【配製】 取四苯硼鈉7.0g,加水50ml振搖使溶解,加入新配製的氫氧化鋁凝膠（取三氯化鋁1.0g，溶於25ml水中，在不斷攪拌下緩緩滴加氫氧化鈉試液至pH8～9），加氯化鈉16.6g,充分攪勻，加水250ml,振搖15分鍾，靜置10分鍾，濾過，濾液中滴加氫氧化鈉試液至pH8～9，再加水稀釋至1000ml，搖勻。
【標定】 精密量取本液10ml,加醋酸－醋酸鈉緩沖液(pH3.7)10ml與溴酚藍指示液0.5ml，用烴銨鹽滴定液(0.01mol/L)滴定至藍色，並將滴定的結果用空白試驗校正。根據烴銨鹽滴定液(0.01mol/L)的消耗量，算出本液的濃度，即得。 本液臨用前應標定濃度。 如需用四苯硼鈉滴定液(0.01mol/L)時，可取四苯硼鈉滴定液(0.02mol/L)在臨用前加水稀釋製成。必要時標定濃度。
【貯藏】 置棕色玻瓶中，密閉保存。
4、甲醇鈉滴定液(0.1mol/L) CH3ONa=54.02
5.402g→1000ml
【配製】 取無水甲醇（含水量0.2％以下）150ml，置於冰水冷卻的容器中，分次加入新切的金屬鈉2.5g，俟完全溶解後,加無水苯（含水量0.02％以下）適量,使成1000ml，搖勻。
【標定】 取在五氧化二磷乾燥器中減壓乾燥至恆重的基準苯甲酸約0.4g，精密稱定，加無水甲醇15ml使溶解，加無水苯5ml與1％麝香草酚藍的無水甲醇溶液1滴,用本液滴定至藍色,並將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml的甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)相當於12.21mg的苯甲酸。根據本液的消耗量與苯甲酸的取用量，算出本液的濃度，即得。 本液標定時應注意防止二氧化碳的干擾和溶劑的揮發，每次臨用前均應重新標定。
【貯藏】 置密閉的附有滴定裝置的容器內,避免與空氣中的二氧化碳及濕氣接觸。
5、甲醇鋰滴定液(0.1mol/L) CH3OLi=37.97
3.797g→1000ml 除取新切的金屬鋰0.694g外,該滴定液的配製、標定、貯藏照甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)方法。
6、亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L) NaNO2=69.00
6.900g→1000ml
【配製】 取亞硝酸鈉7.2g，加無水碳酸鈉(Na2CO3)0.10g,加水適量使溶解成1000ml，搖勻。
【標定】 取在120℃乾燥至恆重的基準對氨基苯磺酸約0.5g,精密稱定，加水30ml與濃氨試液3ml,溶解後，加鹽酸(1→2)20ml，攪拌，在30℃以下用本液迅速滴定，滴定時將滴定管尖端插入液面下約2/3處,隨滴隨攪拌；至近終點時,將滴定管尖端提出液面,用少量水洗滌尖端，洗液並入溶液中，繼續緩緩滴定，用永停法(附錄Ⅶ A)指示終點。每1ml的亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當於17.32mg的對氨基苯磺酸。根據本液的消耗量與對氨基苯磺酸的取用量，算出本液濃度，即得。 如需用亞硝酸鈉滴定液(0.05mol/L)時,可取亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)加水稀釋製成。必要時標定濃度。
【貯藏】 置玻璃塞的棕色玻瓶中，密閉保存。
7、草酸滴定液(0.05mol/L) C2H2O4·2H2O=126.07
6.304g→1000ml
【配製】 取草酸6.4g，加水適量使溶解成1000ml，搖勻。
【標定】 精密量取本液25ml,加水200ml與硫酸10ml,用高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)滴定，至近終點時，加熱至65℃，繼續滴定至溶液顯微紅色，並保持30秒鍾不退；當滴定終了時，溶液溫度應不低於55℃。根據高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)的消耗量，算出本液的濃度，即得。 取需用草酸滴定液(0.25mol/L)時，可取草酸約32g,照上法配製與標定，但改用高錳酸鉀滴定液(0.1mol/L)滴定。
J. 0.5的溴酚藍指示劑如何配製
0.5%的溴酚藍指示劑配置方法：
將0.5克溴酚藍溶於100毫升20%的乙醇溶液中，搖勻。