① 甘油保存菌種的方法
准備材料:甘油保存菌種時,准備甘油、離心管、槍頭的工具並消毒滅菌。 調配比例:根據菌種調配甘油,一般甘油和菌液的比例是20:80。 控制溫度:根據冷藏時間使溫度在零下20度或零下70度。 注意事項:嚴格控制溫度。
甘油保存菌種的方法及步驟
1、准備材料
甘油保存菌種時,首先要根據需要保存的菌種,准備足夠的甘油、離心管、槍頭的工具,其中離心管要准備2ml容量大小,將准備好的工具放在121度的環境中消毒滅菌20分鍾。
2、調配比例
根據菌種調配甘油,採用20%的甘油來保存菌種,那麼甘油和菌液的比例就是20:80,菌種不同甘油的比例也不同,例如鏈球菌屬保存時,除了甘油還需要少量的生理鹽水製作保存液。
3、控制溫度
將純化後的菌種放入調配好的甘油保存液中,放在零下20度或者零下70度的環境中冷藏,溫度不同保存的時間長短也不一樣,零下20度的最多隻能保存1年,而零下70度的保存時間為2-4年。
4、注意事項
甘油保存菌種時,必須要經過消毒滅菌,嚴格控製冷藏的環境溫度,以免出現菌種死亡或者被污染,另外用來保存的菌種與標准菌菌株的特性不同,冷凍的降溫速度要保持在1度/分鍾。
② 用甘油保存真菌需要多大的比例
我這里一般是需要用到質粒的大腸桿菌用15%的甘油1:1 和菌液混合,酵母用的是30... 的比例加入菌液和甘油,一定要混勻,然後放在-70 度冰箱中保存。
③ 細菌甘油保存法是在什麼容器中保存50%甘油如何配置
ep管或小試管均可,
配置;蒸餾水和甘油一比一混合即可
視設備條件而定
,兩種方法都行,我比較傾向於第二種方法,它有利於控制雜菌感染
④ 甘油如何冷藏細菌,具體的操作步驟是什麼希望能分條列出來。
1、配製30%(體積分數)的甘油水溶液,離心管若干 滅菌備用。
2、將細菌用富集培養基搖瓶培養過夜,根據保藏要求(有些要求高的項目中菌要達到一定OD值)培養。
3、將菌液和滅菌的甘油水溶液按照2:1的體積比例在離心管中混勻(使最終甘油濃度為10%,其實甘油多點也沒關系),-70°冰箱保存。
⑤ 甘油菌保藏的甘油最終濃度為多少
常用的是終濃度 10-30% 的甘油。
由於純甘油十分粘稠,很難定量,一般配成終濃度 50% 的水溶液,高壓滅菌後室溫保存即可。使用時按 50% 甘油:菌液 = 1:1 混合均勻,然後迅速凍結。
A. 先把甘油稀釋成50%,然後滅菌
這樣20%的終濃度用400微的菌體加600微的50%甘油混合不就可以啦
純的甘油太粘稠啦,用槍不好吸的 B 終濃度15%。甘油配成80%的濃度,到時候加800微升菌體,200微升甘油就好。
⑥ 加甘油保菌要不要混勻
純甘油高壓滅菌後分裝-20℃保存待用;
離心管單獨滅菌;
我們保存菌種時取800微升的菌液置於離心管中,再取分裝好的純甘油200微升與菌液混合,劇烈震盪,充分混勻,置-20℃或-80℃保存均可.
⑦ 甘油菌保藏的甘油最終濃度為多少
將擬保藏菌種對數期的培養液直接與經121℃蒸汽滅菌20min的甘油混合,並使甘油的終濃度在10%~15%,再分裝於小離心管中,置低溫冰箱中保藏。基因工程菌常採用本法保藏。
⑧ 甘油如何保菌
甘油保存菌種:取需要保存菌種的菌液與80%滅菌之後的甘油按照菌液:甘油=5:2的比例混合,零下70度保存(零下20度保存時間較短)。
甘油管冷凍保藏法是利用微生物在甘油中生長和代謝受到抑制的原理達到保藏目的。
滅菌之後的甘油與菌種混合之後可以選擇零下20度保存或者零下70度保存,一般實驗室選擇零下20度保存就可以了,零下20度保存時間可以達到一年左右,零下70度保存的時間更久,當然保存條件也更為苛刻,針對一般實驗室來說取用也不方便。
(8)丙三醇保菌液怎麼配置擴展閱讀:
其他保存菌種的方法
傳代培養保藏法:簡單來說就是將菌種接種在固體斜面培養基上,包上報紙或者油皮紙放入2-8度的條件下保存,可以隨時取用,隨時觀察菌種生長情況。
液體石蠟覆蓋保藏法:是在斜面培養物和穿刺培養物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,保證在培養基水分蒸發的時候避免菌種死亡,此外因液體石蠟的密封性還可以避免菌種接觸氧氣,導致菌種代謝加快。
⑨ 丙三醇(分析純)怎麼配置5mol/L丙三醇的溶液,需要多少毫升的丙三醇(分析純)
丙三醇的分子式為 C3H8O3,分子量為92.09, 20℃時的密度為1.26331g/mL
20℃時15mol丙三醇的體積為:15×92.09/1.2633=1093.4(mL)
量取1093.4毫升20℃的丙三醇(分析純),加水稀釋至1升,即得5mol/L的丙三醇溶液。
唉,下次不要再把數據搞錯了!