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配置蛋白腖水PH高怎麼調

發布時間: 2022-12-18 01:30:58

⑴ 請問牛肉膏蛋白腖培養基如何配置

牛肉膏蛋白腖培養基的配方如下:

牛肉膏 3g

蛋白腖 10g

NaCl 5g

瓊脂 15—20g

水 1000ml

pH 7.4—7.6

三、器材

牛肉膏,蛋白腖, NaCl,瓊脂;

1mol/L NaOH, 1mol/L HCl;

試管,三角燒瓶,燒杯,量筒,玻棒,培養基分裝器,扭力天平,牛角匙,高壓蒸汽滅菌鍋,pH試紙( pH 5.5—9.0),棉花,牛皮紙,記號筆,麻繩,紗布等。

四、操作步驟

1.稱量

按培養基配方比例依次准確地稱取牛肉膏、蛋白腖、NaCl放入燒杯中。牛肉膏常用玻棒挑取,放在小燒杯或表面皿中稱量,用熱水溶化後倒入燒杯。也可放在稱量紙上,稱量後直接放入水中,這時如稍微加熱,牛肉膏便會與稱量紙分離,然後立即取出紙片。蛋白腖很易吸潮,在稱取時動作要迅速。另外,稱葯品時嚴防葯品混雜,一把牛角匙用於一種葯品,或稱取一種葯品後,洗凈、擦乾,再稱取另一葯品,瓶蓋也不要蓋錯。

2.溶化

在上述燒杯中可先加入少於所需要的水量,用玻棒攪勻,然後,在石棉網上加熱使其溶解。待葯品完全溶解後,補充水分到所需的總體積。如果配製固體培養基,將稱好的瓊脂放入已溶化的葯品中,再加熱溶化,在瓊脂溶化的過程中,需不斷攪拌,以防瓊脂糊底使燒杯破裂。最後補足所失的水分。

3.調pH

在未調pH前,先用精密pH試紙測量培養基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培養基中逐滴加入1mol/L NaOH,邊加邊攪拌,並隨時用pH試紙測其pH值,直至pH達7.6。反之,則用1mol/L HCl進行調節。注意pH值不要調過頭,以避免回調,否則,將會影響培養基內各離子的濃度。

對於有些要求pH值較精確的微生物,其pH的調節可用酸度計進行(使用方法,可參考有關說明書)。

4.過濾

趁熱用濾紙或多層紗布過濾,以利結果的觀察。一般無特殊要求的情況下,這一步可以省去(本實驗無需過濾)。

5.分裝

按實驗要求,可將配製的培養基分裝入試管內或三角燒瓶內。分裝裝置見圖Ⅴ-1。

分裝過程中注意不要使培養基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。

(1)液體分裝分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。

(2)固體分裝分裝試管,其裝量不超過管高的1/5,滅菌後製成斜面,如圖Ⅴ-2。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。

(3)半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜,滅菌後垂直待凝。

6.加塞

培養基分裝完畢後,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物進入培養基內而造成污染,並保證有良好的通氣性能(棉塞製作方法附本實驗後面)。

7.包紮

加塞後,將全部試管用麻繩捆紮好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道麻繩紮好。用記號筆註明培養基名稱、組別、日期。三角燒瓶加塞後,外包牛皮紙,用麻繩以活結形式紮好,使用時容易解開,同樣用記號筆註明培養基名稱、組別、日期。

8.滅菌

將上述培養基以1.05kg/cm2(15磅/英寸2),121.3℃, 20分鍾高壓蒸汽滅菌。如因特殊情況不能及時滅菌,則應放入冰箱內暫存。

9.擱置斜面

將滅菌的試管培養基冷至50℃左右,將試管棉塞端擱在玻棒上,擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。

10.無菌檢查

將滅菌的培養基放入37℃的溫室中培養24—48小時,以檢查滅菌是否徹底。

附:棉塞的製作

棉塞的作用有二:一是防止雜菌污染;二是保證通氣良好。因此,棉塞質量的優劣對實驗的結果有很大的影響。正確的棉塞要求形狀、大小、松緊與試管口(或三角燒瓶口)完全適合,過緊則防礙空氣流通,操作不便;過松則達不到濾菌的目的。加塞時,應使棉塞長度的1/3在試管口外,2/3在試管口內,如圖Ⅴ-3。棉塞的製作過程如圖Ⅴ-4。

此外,在微生物實驗和科研中,常要用通氣塞。所謂通氣塞,就是幾層紗布(一般為8層)相互重疊而成,或是在兩層紗布間均勻鋪一層棉花而成。這種通氣塞通常加在裝有液體培養基的三角燒瓶口上。經接種後,放在搖床上進行振盪培養,以獲得良好通氣促使菌體的生長或發酵。通氣塞的形狀

⑵ 怎樣配製肉湯蛋白腖瓊脂培養基

其配方如下:
蛋白腖10g 牛肉膏3g 氯化鈉5g 蒸餾水1000mL 煮沸後調節Ph7.2-7.4 分裝到三角瓶中
121℃高壓滅菌15min。

⑶ 配置培養基時,為什麼在分裝前要調節PH至7.4~7.6

你所配置制是常用的牛肉膏蛋白腖培養基 一般情況下都是調節pH7.4~7.6
培養基的配製是根據你所要培養的東西的特性來配備的 並不是一成不變的 要想很好的培養一個品種 只有慢慢的探索 逐漸調節培養基 以便達到最好的培養狀態
至於經典的培養基 比如你說的這個配方 適合很多的常見細菌的培養 在生物教學試驗中經常用到 所以要求你們掌握 它的PH規定的就是這個范圍
至於為什麼在這個范圍 就是因為在這個范圍內 適合培養很多常見細菌
如果有需要 是可以超過這個范圍調節PH的 比如需要某些細菌在PH不適應下產生的某些物質

⑷ 如何配置牛肉膏蛋白腖培養基來檢測飲用水中的細菌數

按蛋白腖1%,氯化鈉0.5%,牛肉膏0.3%的比例配置,調PH值至7.2-7.6後,加2%瓊脂,121℃滅菌20分鍾。

⑸ 牛肉膏蛋白腖經培養後pH值變鹼性,如何控制pH在酸性范圍,加過磷酸鹽緩沖溶液 還是緩沖不住。。

首先你可以用ph更低的緩沖液試試,第二個問題要看你培養的具體細菌類別。原理上可以替代但是可能還是會變鹼性。

⑹ 葡萄糖蛋白腖水如何配製

你是做生理生化實驗吧。
配方應該是:0.5g蛋白腖,0.5g葡萄糖,0.2gK2HPO4,溶於100mL去離子水中,調pH7.2至7.2,分裝試管,滅菌

⑺ 如何提高蛋白腖理化指標

蛋白腖檢驗規程

1、理化指標

pH測定:稱取2.0g的乾粉蛋白腖置於100mL的蒸餾水或去離子水中,加熱完全溶解製成2%的溶液,測定其pH值,范圍應在pH5.5~7.5;

可溶性:稱取2g、10g的乾粉蛋白腖,加入到100mL蒸餾水或去離子水中配製成2%、10%

的溶液,溶液應澄清透明,無沉澱,顏色判斷分無色、微黃、淺黃、黃色、深黃、

棕色。

2、生化指標

糖發酵試驗:稱取腖2.0g、NaCL 0.5g、酚紅0.002g、蒸餾水或去離子水100ml,配製溶液,調節其pH值7.2~7.4,以每管6.0ml分裝,115℃/15min高壓滅菌,接種大腸埃希氏桿菌的18~24h的新鮮培養物,35±2℃培養18~24h觀察結果,應為陰性,即培養基顏色應為橙紅色。培養基顏色變成黃色報告陽性。

H2S試驗:稱取腖1.0g,加100ml的蒸餾水或去離子水配製成1.0%的腖水,以每管6ml分

裝,121℃/15min高壓滅菌,接種傷寒沙門氏菌的18~24h的新鮮培養物,將PbAc

試紙插入試管中,試紙下段距離液面2~3cm,蓋好試管蓋。30~35℃培養24~48h,

觀察結果,PbAc試紙條的黑色域不得小於0.5cm。

靛基質(吲哚)試驗:稱取腖1.0g,加100ml的蒸餾水或去離子水配製成1.0%的腖水,以每管6ml分裝,121℃/15min高壓滅菌,分別接種大腸埃希氏桿菌、傷寒沙門氏菌的18~24h的新鮮培養物,35±2℃培養18~24h。觀察結果時每管加入4~5滴入靛基質試劑,大腸埃希氏桿菌應為陽性,10s內液面上出現玫瑰紅色環,傷寒沙門氏菌呈陰性。

V-P試驗:稱取腖0.7g、葡萄糖0.5g、NaCl 0.5g,加100ml蒸餾水或去離子水配製溶液,

調節其pH7.2~7.4,以每管6ml分裝115℃/15min高壓滅菌,分別接種產氣腸桿菌(如45103)、大腸埃希氏桿菌(如44104)的18~24h的新鮮培養物,35±2℃培養18~24h。觀察結果時,除去試管帽,依次加入VP試劑甲、乙液, 甲乙液比例:3/1,加入的量甲液9滴,乙液3滴;之後放置36℃培養箱孵育,30min內接種產氣腸桿菌的管中出現紅色的為陽性反應,大腸桿菌的呈陰性反應。

生長試驗:配製培養基:2.0g腖、0.5gNaCl、1.5g的瓊脂,加入到100mL蒸餾水或去離子水中,加熱完全溶解,調節pH值7.2~7.4,121℃/15min高壓滅菌,待溫度降到50℃左右時傾注平板,接種100~1000cfu/ml的金黃色葡萄球菌和大腸埃希氏桿菌,35±2℃培養18~24h觀察結果,應生長良好。接種的金黃色葡萄球菌和大腸桿菌是通過比濁的方法稀釋到-7和-8,接種量為1ml,每個稀釋度需作兩塊平板,要求-7平板上生長菌落100左右。

色素試驗:配製培養基:2.0g腖、0.5gNaCl、1.5g的瓊脂, 加入到100mL蒸餾水或去離子水中,加熱完全溶解,調節pH值7.2~7.4,121℃/15min高壓滅菌,待溫度降到50℃左右時傾注平板, 充分凝固後,劃線(四區劃線接種的方式)接種金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞桿菌的新鮮培養物,35±2℃培養18~24h觀察結果,均應四區均生長,接種金黃色葡萄球菌的平板上有黃色色素生成,接種銅綠假單胞桿菌的平板上有綠色色素生成。
實驗要嚴格按操作進行,掌握要點,積累經驗,沒有約定俗成的,要有自己的一套,

⑻ 配置牛肉膏蛋白腖培養基什麼時候調節ph

嚴格要求PH的情況下,應該在溶解完全並讓溶液處於室溫時調節PH至恰當范圍。但實際上配置培養基並不需要如此嚴格,只需要在配置前將配置用水調節至合適PH范圍就可以了。

⑼ 中國葯典中pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液如何配製

取磷酸氫二鉀3.56g,磷酸氫二鈉7.23g,氯化鈉4.30g,蛋白腖1.0g加純化水1000ml溶解,滅菌即可

⑽ 牛肉膏蛋白腖培養基配方是什麼

牛肉膏蛋白腖培養基的配方如下:牛肉膏3g。蛋白腖10g。NaCl 5g。瓊脂15—20g。水1000ml。pH 7.4—7.6。

牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基是一種應用十分廣泛的天然培養基,其中的牛肉膏為微生物提供碳源、磷酸鹽和維生素,蛋白腖主要提供氮源和維生素,NaCl提供無機鹽。步驟稱量,按培養基配方比例依次准確地稱取牛肉膏、蛋白腖、NaCl放入燒杯中。


牛肉膏蛋白腖培養基步驟

稱量

按培養基配方比例依次准確地稱取牛肉膏、蛋白腖、NaCl放入燒杯中。牛肉膏常用玻棒挑取,放在小燒杯或表面皿中稱量,用熱水溶化後倒入燒杯。也可放在稱量紙上,稱量後直接放入水中,這時如稍微加熱,牛肉膏便會與稱量紙分離,然後立即取出紙片。

溶化

在上述燒杯中可先加入少於所需要的水量,用玻棒攪勻,然後,在石棉網上加熱使其溶解。待葯品完全溶解後,補充水分到所需的總體積。如果配製固體培養基,將稱好的瓊脂放入已溶化的葯品中,再加熱溶化,在瓊脂溶化的過程中,需不斷攪拌,以防瓊脂糊底使燒杯破裂。

調pH

在未調pH前,先用精密pH試紙測量培養基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培養基中逐滴加入1mol/L NaOH,邊加邊攪拌,並隨時用pH試紙測其pH值,直至pH達7.6。反之,則用1mol/L HCl進行調節。注意pH值不要調過頭,以避免回調,否則,將會影響培養基內各離子的濃度。

以上內容參考:網路——牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基