待雙擊運行資料庫備份的文件
XXX.CMD
內容：
isql
-U
用戶名
-P
密碼
-S
資料庫IP
-i
待執行備份的SQL文件
舉例：
//hgmd_in.cmd
isql
-U
sa
-P
sa
-S
127.0.0.1
-i
hgmd_in.sql
待執行備份的SQL文件
XXX.SQL
內容：
use
待備份資料庫名
go
backup
database
資料庫名
to
disk='磁碟路徑'
with
init
go
//hgmd_in.sql
--
資料庫：hgmd_in
use
hgmd_in
go
--先備份資料庫
backup
database
hgmd_in
to
disk='d:\hgmd_in_0301a.bak'
with
init
go
❷ 資料庫醫生查詢表的信息代碼怎麼填
根據《國家醫療保障局辦公室關於貫徹執行15項醫療保障信息業務編碼標準的通知》，為加快形成全國統一的醫療保障信息業務編碼標准，現就做好國家醫保編碼的對碼貫標工作緊急通知如下：
一、貫標產品
所有在省醫葯采購服務平台掛網采購的葯品醫用耗材（不含檢測試劑），都需要開展對碼貫標工作。
二、工作內容
對比國家醫療保障局編制的葯品醫用耗材信息表，查找與掛網葯品、醫用耗材相同的產品信息，選填對應的國家醫保編碼。
【拓展資料】
三、操作方法
（一）葯品貫標
1.已掛網葯品的貫標。葯品生產企業登錄「葯品議價采購系統」，進入「基礎資料庫管理」-「產品信息維護」，勾選掛網葯品後，點擊「編輯醫保代碼」按鈕，選擇對應的葯品關聯醫保葯品代碼，如未查詢到相同的葯品，勾選「暫未取得國家醫保編碼」，點擊確定。
2.申請掛網的新上市葯品的貫標。葯品生產企業登錄「葯品議價采購系統」，在「基礎資料庫管理」-「產品信息注冊」，點擊「新增」按鈕，在「醫保葯品代碼」中選擇對應醫保代碼。
（二）醫用耗材貫標
1.已掛網醫用耗材的貫標。耗材生產企業登錄「醫用耗材掛網交易系統」，進入「基礎管理」-「國家醫保代碼貫標」菜單，選擇單件進行關聯或通過Excel導入方式進行關聯。如未取得國家醫保編碼的，勾選「暫未取得國家醫保編碼」 ，點擊確定。
2.申請掛網的新上市醫用耗材的貫標。耗材生產企業登錄「醫用耗材掛網交易系統」，進入「基礎管理」-「企業耗材信息上報」菜單，點擊「新建」按鈕，在「醫保耗材分類代碼」中選擇對應醫保代碼。
（三）注意事項
如未查找到本企業掛網產品的醫保編碼，請登錄國家醫療保障局官網，進入「醫保業務編碼標准動態維護」欄目進行維護，待取得醫保編碼後，後期再進入省醫葯采購服務平台進行貫標。
❸ sql server 怎樣創建資料庫備份
待雙擊運行資料庫備份的文件
XXX.CMD
內容：
isql -U 用戶名 -P 密碼 -S 資料庫IP -i 待執行備份的SQL文件
舉例：
//hgmd_in.cmd
isql -U sa -P sa -S 127.0.0.1 -i hgmd_in.sql
待執行備份的SQL文件
XXX.SQL
內容：
use 待備份資料庫名
go
backup database 資料庫名 to disk='磁碟路徑' with init
go
//hgmd_in.sql
-- 資料庫：hgmd_in
use hgmd_in
go
--先備份資料庫
backup database hgmd_in to disk='d:\hgmd_in_0301a.bak' with init
go
❹ 分子生物學中 Xq12.1/13表示什麼意思，染色體的什麼部位
目前全世界約有400餘名第三代「試管嬰兒」出生，其標志是植入前遺傳學診斷（preimplantation genetic diagnosis, PGD）技術的應用。植入前遺傳學診斷是指通過體外受精獲得的胚胎在送入母體宮腔前取一個或幾個胚胎細胞進行遺傳學分析。據估計，人群中約有1/4到1/5的人患某種遺傳病，平均每人攜帶5~6個致病基因。這將對未來的人類造成巨大的遺傳負荷（genetic load），因此PGD的產生與完善使得「試管嬰兒」技術不再局限於不孕症的治療，它在阻斷遺傳病傳播、降低人類遺傳負荷上都具有重要意義。 #Sg /
)('{q}JxV
在進行PGD時，遺傳物質發生變化的方式不同，因此採用的分子生物學方法也不同。大體可將此技術歸為四類：染色體分析、DNA分析、RNA分析和蛋白質分析。 tx3p, X
o'P [uB/
z}VCiS0
染色體分析 2j>C4Ck
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人類23對染色體，任何染色體數目或結構發生變化，均將導致某種綜合征。由於促排卵葯物的應用以及體外環境中諸多因素的影響，使得體外受精獲得的胚胎染色體異常率高達30%左右，一些胚胎發育阻滯也與染色體異常有關。因此在植入前對染色體進行分析是十分必要的。 CS"k0V44}
b$Bq#vdg:
染色體分析普遍採用熒光原位雜交（FISH）。其原理是：將DNA探針用不同顏色熒光染料標記，可與固定在玻片上的卵裂球細胞不同染色體雜交後，在熒光顯微鏡下呈現不同顏色的熒光。通過這種方法可以在5~6小時內分析5條或6條以上染色體[1]。FISH流程中最費時間的步驟是雜交。根據使用的探針不同需要30分鍾至過夜。Liu等在檢測X和Y染色體時採用微波處理使變性、雜交時間縮短至1分鍾，全過程只需40分鍾就可完成[2]。 7BA9zs392
V3pn@ 'pr
FISH簡要操作流程為：第一步，將卵裂球細胞固定在玻片上。第二步，漂洗玻片破胞。第三步，脫水。第四步，熒游標記探針，並使之與卵裂球染色體雜交。第五步，漂洗除去背景染料。第六步，加入DAPI負染，並在熒光顯微鏡下觀察。 +w3k_^X9c
R&R{I/;i*.
由於FISH耗時少，不存在細胞丟失造成的誤診，因此成為常規篩查手段。通過FISH可以篩查多倍體、單倍體、單體、三體、多X、多Y以及染色體平衡易位等[3]。國外主張對35歲以上以及三次IVF失敗的患者在植入前行FISH。 uUpOa+t
ZcN%F)htm
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b zMs\rj\
DNA分析 Zf`dd T
fNi_C"<
迄今已有1 000多種遺傳性疾病的基因被定位，隨著人類基因組計劃（HGP）工作的進展，人類所攜帶的10萬對基因密碼將全部揭示，為PGD提供直接可靠的依據。在PGD中，可提供的細胞極少， PCR成為樣品預處理的基本方法。 h@ ?BA<'S
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G@n% P~
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本課題受黑龍江省95攻關課題資助. 7[ra#>e8'
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作者單位：150086 哈爾濱醫科大學附屬二院婦產科 jlZW!$ Iq
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U= PG0
Et+N4w
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PCR已成功地用於進行性肌營養不良（DMD）、X-脆性染色體、新生兒溶血、a -地中海貧血、囊性纖維病（cystic fibrosis）等遺傳性疾病的PGD。另外，其它疾病如：黑朦白痴（Tay-Sachs）、進行性錐肌萎縮（Werding Hoffman disease）等疾病也可用分子生物學的方法進行檢測。多種改進PCR被用於PGD。 AcYL 3
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1. 引物延伸預擴增（primer extension preamplification，PEP） U:`g12
Y Dyi6x,
對植入前胚胎的單個細胞的單拷貝基因進行操作，其難度是可想而知的。如果將這個單細胞的整個基因組全部擴增，使目的基因成為多拷貝，再針對該目的基因進行二次擴增，那麼其技術難點不攻而破。首先採用多個隨機引物擴增染色體任意片段，再用目的基因的引物擴增目的基因，其可靠性和靈敏度都有所提高。PEP主要用於單基因遺傳病的診斷。Veyer等採用PEP法對RH新生兒溶血病RH（D）基因進行研究，並應用於PGD，預防新生兒溶血病的發生。 * qE[Y0Cd
|!)3[<.
2. 巢式PCR T%xB|^ lf
4PEJ}B W
採用兩個反應系統、兩套引物，可以提高PCR產物特異性，許多遺傳性疾病已採用巢式PCR進行檢測，如囊性纖維病、黑朦白痴[4]、新生兒溶血[5]、Marfan綜合征[6]等。 j%KLp4J/e
$N=A,S
3. 原位PCR %97IXr E
C BTa9|57
原位PCR是PCR擴增技術與原位雜交技術的完美結合。其原理是先將卵裂球細胞固定在玻片上，在原位上對目的基因進行PCR擴增，然後通過原位雜交法對目的基因進行檢測。其基本過程為：第一步，將卵裂球細胞用福爾馬林、多聚甲醛或酒精溶液固定在玻片。第二步，採用蛋白酶、胰酶等消化細胞膜。第三步，在玻片上進行PCR，蓋上蓋片封口後，置專門的玻片式PCR儀上進行擴增。一般採用熱啟動PCR開始首次循環。第四步，原位雜交檢測，可以在擴增後與標記探針雜交檢測，也可在PCR反應過程中摻入地高辛、生物素或熒光素標記的dUTP，直接檢測PCR產物。 Kl$!_$
Mnaoh :z
原位PCR技術使原位雜交技術的靈敏度大大提高，可用於測定低單拷貝的DNA序列，並進行定性、定量、定位分析。它具有快速、靈敏、准確等優點，被認為是FISH的潛行替代者。 Y2w 9]:J
H>`?S {J
4．免疫PCR pWB)N7x&
V2'(}k
免疫PCR是PCR法與ELISA法的融合技術，它利用了PCR的大量擴增能力和抗原抗體反應的特異性。其原理是將目的基因的PCR擴增產物用生物素標記，檢測突變的特異性探針用地高辛標記，二者經變性退火處理後加到含抗生物素的酶標板內，通過顯色來鑒定突變是否存在。根據顯色深淺繪制曲線，做定量分析。該法已用於囊性纖維病CFTR等基因突變的檢測。 h.g11xa
l yx p:
5. 熒游標記定量PCR（TaqMan PCR） ~y^#?;
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TaqMan PCR的特色之處是除常規引物外，還使用兩端標記了熒光素的DNA探針（TaqMan探針），該探針可與目的基因內部的一段序列互補雜交，當新鏈合成到TaqMan探針雜交處時，Taq酶可將其切除而繼續延伸反應，只有完全互補雜交的DNA鏈才能被Taq酶分解，因此通過該法可鑒定出兩個基因間數個鹼基的差異。另外，通過測定熒光可隨時對產物進行定量分析。 U\ y?P:yy
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t[F tIj6
6. 等位基因特異性擴增（allele-specific amplification , ASA） o 1#XM/ Z
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ASA主要用於點突變導致的遺傳病的檢測。其原理是：在設計引物時，根據已知突變位點的特徵，在引物3』端或中間設計一錯配鹼基，使之僅能與突變型或野生型基因互補，而只擴增相對應的突變型或野生型基因。其優點是只需一步PCR，而無需電泳技術和標記技術，擺脫了分子生物學中電泳瓶頸現象。在此基礎上發展起來的ASA法的顏色互補分析（color complementation assay）是在相互競爭的突變型和野生型引物中，分別採用不同熒光染料標記擴增的DNA，直接對擴增產物進行判讀。另外採用內嵌引物也可提高產物特異性和產量，採用具有特定酶切位點的內嵌式引物，DNA擴增後用酶切割，根據酶切產物便可明確是否有基因突變，該法已應用於單個精子的DNA分析。 P~i^V;g
#v')iR"
7．微衛星DNA的PCR（SRS-PCR） <2ff cBv
<k5Fl vE2
多基因遺傳病主要為一些常見病（如精神分裂症、哮喘、原發性高血壓、糖尿病、冠心病、風濕性關節炎等）和先天畸形（如唇裂、脊柱裂、無腦兒、先天性心臟病等），目前其易感基因研究常用的遺傳標記是微衛星標記。微衛星DNA（microsatellite DNA）又稱簡單重復序列（SRS），能參與遺傳物質的結構改變、基因調控，是基因重組和基因變異之源。SRS重復序列拷貝數可以發生突變，表現為動態突變。X-脆性綜合征、強直性肌營養不良、Kennedy』s綜合征，脊髓小腦共劑失調I等遺傳性疾病都與之有關。SRS-PCR已用於X-脆性染色體的PGD。將X-脆性等位基因歸為正常、前突變型和完全突變型三種。這段重復序列在正常個體中存在多態性，從6個到50個重復不等。完全突變型CGG重復數超過200個病伴有甲基化，表現為智力低下。具50~200個重復並無甲基化為前突變型，其智力低下可能性很小[7]。 djPr 4Nog
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8. 甲基化特異PCR(M-PCR) %g0"Kj5
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某些遺傳疾病與DNA甲基化有關，如Prader-Willi綜合征(PNS)和Angelman綜合征（AS）患者CpG島發生差異甲基化而使基因失活。M-PCR原理是設計CpG島的甲基化和非甲基化的特異引物各一對，進行特異性擴增來鑒定基因組印跡現象。 \"_;rJ{!aE
@*q\$Eg}2
DNA分析往往以已知基因序列為前提，因此，需要了解基因突變數據，人類基因突變資料庫（HGMD）為基因分析提供了便利條件。HGMD包括已發表的鹼基替換、缺失、復制、插入及重排等突變，可在世界廣域網上共享，通過上網便可查詢遺傳病基因突變的數據信息。 wv ,F>5P
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RNA分析 {;Mcor3
0d`s(b54;O
在進行PGD時卵裂球細胞只能取1-2個，滋養外胚層細胞也只能取5-10個細胞，DNA 的含量很低，如果已知某種與遺傳病有關的基因在體外培養期間確實已開始表達，那麼測定mRNA則是遺傳病診斷的另一途徑，其優點是底物拷貝數相對較多。 [_L:.,] g8
mmTc.x h
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RT-PCR法 0D|^S< z6
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RT-PCR法進行遺傳分析的原理是將遺傳病基因所表達的mRNA反轉錄成cDNA，再對cDNA進行擴增，來檢測目的基因。目前已將RT-PCR法應用於Marfan綜合征患者的PGD[8]。 ~e~4S~{
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基因表達的微點陣分析 lY.FmF}k
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卵裂球細胞遺傳物質的任何改變都將導致基因表達的變化，卵裂球細胞是否正常發育，是否有細胞凋亡跡象，將體現在RNA表達中。Brown小組正在研製一種新的基因表達分析系統—微點陣分析（microarray assay），他們將人類已知基因的cDNA用熒游標記與滴加待測樣品的點陣玻片雜交，通過掃描器測定熒光光譜，經計算機軟體處理可以定量監測某一基因的表達。該方法非常快速，一天內可檢測幾千個基因的活性。那麼如果設計一個完善的符合體外培養細胞的cDNA文庫的點陣玻片，那麼PGD 迄不成了一個自動化測定的過程。此項工作還未應用於PGD，是一項前景可觀、有待開發的領域。 8.{5c6G
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蛋白質分析 f g*IHha
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蛋白質與生物特性直接相關，對蛋白質分析是PGD的另一個方向。被稱為「臨床分子掃描器」的質譜儀可用於細胞抽提物中蛋白質2D凝膠斑點鑒定。其原理是細胞內蛋白質在電泳過程中，根據所帶電荷和分子大小被分離開呈現由1000-3000個斑點組成的特徵圖譜，其中每個斑點代表一個蛋白，蛋白斑點圖譜不僅可以顯示蛋白質含量，而且還能夠顯示它是否進行了翻譯後修飾。圖譜的變化往往反應出某種疾病，尤其是蛋白質翻譯後修飾發生變化被認為是導致疾病的徵兆[10]。關於植入前胚胎細胞蛋白組的研究目前尚無報導。 "sUL"i
dE.R$SM
五、其它技術 9y>dDN M\<
Gi6sl_"q
男性不育患者通過IVF或ICSI技術可以獲得後代，但子代仍面臨不育可能。 ['tGc{4
(6^v`SZ
因為5%-20%的無精和寡精是由基因缺陷造成的，包括Y染色體上的單拷貝基因DAZ（Deleted in Azoospermia）和多拷貝基因RBM（RNA recognition motif）家族片段缺失[11]。對於此類患者主張植入女性胚胎，另外對於Y-連鎖性疾病，亦要求植入女性胚胎。因此，需要在受精前篩選出X精子。採用FISH或PCR法檢測精子，具有破壞性，不能再用於受精。利用一種無毒性且在胞內只暫短停留的熒光染料加染精子，根據兩種精子核質量不同，經流式細胞儀分離出X和Y精子，其受精率仍可達65%以上。受精前精子遺傳學診斷有利於提高胚胎質量，增加可利用胚胎數，減少卵子的浪費。 \WQ\q \
W[ AX?
DNA晶元技術是近年來發展起來的新技術，利用它可以在基因組水平上進行基因表達、基因突變和多態性分析以及遺傳制圖和序列測定，現已應用於人類疾病的診斷。它具有快速、准確、低耗的特點。一次可對上千種基因進行分析，其精細度可達單個細胞單拷貝。不久，在晶元上對某一患者的全部基因組的遺傳分析將成為常規。 2h I M!wQ
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人類基因組計劃帶來的基因組革命與PGD 結合必將使人類在認識自己、防治疾病、自主生命上有一大的飛躍，必將由此而引發人類第三次技術革命。 I ^?TabL
*l)_&p
摘 要 4`I2tr
-Ds} kdxw
目的：鑒定並評估能用於人胚胎植入前遺傳學診斷的分子生物學方法。 cV\(Z6u
"T=Z/@Vy
資料來源：來源於我們的一部分工作並檢索了中國雜志以及美國 婦產科雜志、美國生殖與避孕雜志等。 JF!JY( U ,
UOJx-o!c?
研究選擇：能用於1個細胞中低拷貝DNA或單拷貝DNA檢測的分子生物學方法。 v8Vw.Ce`f
c@wSv2o$
結果：我們將植入前遺傳學診斷技術歸為四類：染色體分析、DNA 分析、RNA 分析以及蛋白質分析。該技術已成功地用於10多種遺傳性疾病的植入前診斷，世界上已有約400名行植入前遺傳學診斷的試管嬰兒誕生。採用單精子注射法可以使無精或寡精患者有孩子，但其後代仍面臨不孕可能，因此建議將X、Y 精子分離後採用女性胚胎植入。 ;R|i@[(J
)e(Rf!P{
結論：根據遺傳物質改變的情況不同，用於植入前遺傳學診斷所採用的方法也不同，隨著人類基因組計劃的進展和分子生物學的發展，對人類全部基因組的遺傳分析將成為常規。 s6bILz-u
DDxbIk t
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