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胰蛋白酶怎麼配置使用

發布時間: 2023-02-24 21:30:51

A. 怎樣配置胰蛋白酶消化液

1.D.Hanks液高壓滅菌之後,晾至室溫,4℃保存備用。
2.稱取一定量胰蛋白酶粉末於研磨器中(夏天時研磨器應放在冰浴中),加入少量D-Hanks液研磨1 000次左右,調製成糊狀。再放入4℃預冷的適量D-Hanks液中,4℃下磁力攪拌使完全溶解。
3.用NaHC03乾粉將胰酶溶液的pH值調至8.0左右(胰酶作用的最適pH值),並加入0.02%EDTA以協助消化作用。
4.濾過除菌,-20℃凍存。
我上次是在華越洋生物買的現成EDTA胰酶消化液,方便多了。

B. 細胞培養用胰蛋白酶溶液如何配製與消毒

博凌科為生物科技-為你解答:胰蛋白酶溶液的配製與消毒:胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰 酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在pH為8.0、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力最強。使用胰酶時,應把握 好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、 Mg2+和血清、蛋白質克降低胰酶的活性,所以配製胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks 液。終止消化時,可用含有血清培養液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。1. 稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調PH到7.2左右)或PBS(D- hanks)液中。攪拌混勻,置於4℃內過夜。2. 用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈台內用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然後分裝成小瓶於-20℃保存以備使用。