『壹』 營養液母液的制備5大步驟
4RN的+ + 2nH2O電解4R + NO2 + 4NH +
4M 22.4n?
?M V
?所以N = 4MV/22.4m
『貳』 培養基母液配製的方法如何
配製培養基是花卉組織培養的首要環節。培養基的成分隨著花卉的種類、不同的外植體、不同的培養階段應當有所不同。一般來說,各種培養基都有大量元素、微量元素、維生素、激素、糖和瓊脂等物質,有時還要在培養基里添加有機附加物,如活性炭、香蕉汁、椰子汁等。在生產上,首先選用已有的培養基配方,它是前人研究的成果,又是經過生產實踐驗證的。現在幾乎各種花卉用的營養基配方都有,可以免去您再研究的麻煩,當然在生產實踐中,也可適當改進。如果您找不到合適的配方,可先試用MS培養基,MS是Murashige和Skoog的縮寫,他們二人於1962年研究出來了這種培養基。下面以MS培養基為例,介紹怎樣配製。
(1)配製母液。把培養基中的必需元素按原配方量的50倍、100倍或1000倍稱量後製成一種濃溶液,這種濃溶液叫母液。在配製培養基時按比例分別量取母液稀釋到所需的濃度即可。母液配好後貼上標簽,放在0~4℃的冰箱中,可使用半年到1年,這樣做可節省許多時間。可能產生化學反應的或溶解後產生沉澱的,不能放在同一個容器中。配製母液要用重蒸餾水。葯物要使用分析純或等級較高的化學純。葯物的稱量和葯液的定容都要准確。
母液①:硫酸鎂18.5克,硝酸銨82.5克,硝酸鉀95.0克。加水定容到1000毫升,濃度為培養基的50倍,配1升培養基時量取20毫升母液。
母液②:氯化鈣22.0克。加水定容到500毫升,濃度為培養基的100倍,配1升培養基時量取10毫升母液。
母液③:磷酸二氫鉀8.5克。加水定容到500毫升,濃度為培養基的100倍,配1升培養基時量取10毫升母液。
母液④:乙二胺四乙酸二鈉3.73克,硫酸亞鐵2.78克。加水定容到1000毫升,濃度為培養基的100倍,配1升培養基時量取10毫升母液。
母液⑤:硼酸620毫克,硫酸錳2230毫克,硫酸鋅860毫克,硫酸銅2.5毫克,碘化鉀83毫克,鉬酸鈉25毫克,氯化鈷2.5毫克。加水定容到1000毫升,濃度為培養基的100倍,配1升培養基時量取10毫升母液。
母液⑥:肌醇5克,甘氨酸100毫克,煙酸25毫克,鹽酸吡哆醇25毫克,鹽酸硫胺素5毫克。加水定容到500毫升,濃度為培養基的100倍,配1升培養基時量取10毫升母液。
(2)配製培養基。配製每1000毫升培養基,稱取6~10克瓊脂作凝固劑,具體按配方要求稱量,放在水浴鍋上慢慢溶解。先在量筒內放入一定量的水,按照母液順序和規定量,量取母液。當母液加完後,根據需要每升培養基再加入生長調節物質如吲哚乙酸或萘乙酸等,細胞分裂素類0.04~10毫克,細胞分裂素應用最多的是6-苄基腺嘌呤,加完後倒入已熔化的瓊脂中。每1000毫升培養基加入蔗糖30克或根據要求確定,定容到所需的體積。繼續加溫,直到瓊脂完全熔解。用鹽酸或氫氧化鈉對培養基的pH進行調節,多數培養基的pH在5.4~6.0之間,MS培養基的pH為5.7。
將配好的培養基趁熱倒入培養容器中,培養基占容器體積的1/3~1/4。不要將培養基沾到容器壁上,否則容易被雜菌感染。然後及時加蓋,進行高壓滅菌,滅菌時要按高壓滅菌鍋的操作規程使用。在121℃、壓力111千帕下維持15~20分鍾,溫度和時間都要嚴格控制。到時間後立即切斷電源,當高壓鍋內壓力降到常壓後,開啟放氣閥,打開鍋蓋,取出滅菌好的培養基,放在接種室中培養3天,沒被感染後才能用來組織培養。
『叄』 tnfα的母液怎麼配置
TNFα是一種細胞因子,對免疫系統具有重要作用。人們通常需要針對TNFα進行研究,因此需要一定濃度的TNFα母液。TNFα母液的配置需要一定的實驗室技能,下面將詳細介紹:
首先,要將TNFα制正鉛劑溶解在適當的溶劑中。常用的溶劑是1 mg/ml的無菌PBS。將TNFα與PBS混合均勻,直到其完全溶解。
接下來,對所配置的TNFα母液進行過濾答清答。使用0.2微米的無菌濾器,清慧將溶液過濾,以去除任何雜質和細菌。過濾完成後,將TNFα母液分裝到小體積管中,並凍存。冷凍後的TNFα母液可以在-80℃下保持穩定性,直到需要使用時,可以在冰上緩慢解凍。
總之,配置TNFα母液需要謹慎地進行實驗,確保它的純度和濃度,以便在後續的實驗中使用。純手打,望採納!
『肆』 1M Trus PH值6.8怎麼配製
般先配置1M母液用候稀釋10mM.
參考:1 M Tris buffer(緩沖范圍pH7.0-8.5) 1L
1稱取121.1 g Tris-Base加入700 ml雙蒸水放置轉旋轉混合溶慶慶解,
2pH計校準Tris-Base完全溶解加入濃鹽酸配春進行酸度調節(加入濃鹽酸溫度升高)調至接近目pH觀察溫度變化並用加熱(水浴微波)或冰浴調節溫度至25 ℃±0.2 ℃使溫度25 ℃±0.2 ℃剛達所需pH值(pH值允許誤差±0.01)
3pH值調節完畢用容量瓶定容至培差耐1 L0.45μm濾膜濾倒入試劑瓶保存標記期名稱
4配1 L pH8.0Tris約需要42 ml濃鹽酸
1M Trus PH值6.8怎麼配製
感覺提問主意不是很清晰
『伍』 急!植物組織培養的母液計算。
對於2000ml的培養基應該是這樣配製的:
所謂1/2MS,指的是大量元素母液,正常的我們應該加入2000除以20即100ml的體積,因為是1/2MS,所以只需要加入50ml;微量元素母液加入:2000/100=20ml;鐵鹽母液2000/100=20ml;有機物母液2000/100=20ml;6BA加入4ml,就是4mg,NAA是0.2ml.蔗糖就是2000乘以3.0 %就是60g,瓊脂為2000乘以0.8 %就是16g
『陸』 培養基中母液的配製有哪幾種方法
培養基的配製應遵循一定的方法和程序,如果每次配製都要按著成分表依次稱量,既費時,又增加了多次稱量的誤差。
為了提高配製培養基的工作效率,一般將常用的基本培養基先配製成10倍或100倍液或更高倍數的貯備液或母液(stocksolution)。
母液的配製常常有兩種方法。一是將培養基的每個組分配成單一化合物母液,一是配成幾種不同化合物的混合母液。
前者便於配製不同種類的培養基,後者在大量配製同種培養基時省時、省力。以MS培養基配製為例,說明母液配製過程中應注意的問題。該配方中除了蔗糖和瓊脂外,還包括有19種成分,其中大多數化合物帶有若干水分子,如果是用不同水分含量的同種化合物代替,則須重新計算其正確用量。通常配製四種貯備母液:大量元素(濃縮20倍)、微量元素(濃縮200倍)、鐵鹽(濃縮200倍)、除蔗糖外的有機物質(濃縮200倍)。在制備這幾種母液時,要避免發生沉澱,通常把每種試劑單獨溶解後(尤其是CaClsubscript2subscript,易與SOsuperscript2-、POsuperscript3-形成硫酸鈣或磷酸鈣的不溶物),再與別的也已經完全溶解的葯品混合,混合已溶解的各種無機鹽時還應注意先後順序。Fesuperscript2+superscript易與某些陰離子形成沉澱而失效,故鐵元素需單獨配製成螯合鐵母液。
各種生長調節物質的母液應分別配製,應先把它們溶解在很少量的適當溶劑中,可加熱助溶,然後再加水定容。母液的濃度一般宜配製成1mmolL或10mmolL。
『柒』 如何准備0.1 mM ABA ABA母液
去試劑公司買標樣,注意溫度和避光。回來後在冰浴避光的條件下配好濃度。一定要注意溫度和光度,前兩天我畢前配ABA母液時,忘記放冰箱保存了,結果滾清經手備清過一晚上就變質了~
『捌』 MS培養基一共有幾種母液分別什麼組分,如何配置
培養基母液的配製和保存 MS培養基含有近30種營養成分,為了避免每次配製培養基都要對這幾十種成分進行稱量,可將培養基中的各種成分,按原量的20倍或200倍分別稱量,配成濃縮液,這種濃縮液叫做培養基母液。
這樣每次使用時,取其總量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀釋,製成培養液。現將制運此寬備培養基母液所需的各類物質的量列出,供配製時使用。大量元素(母液Ⅰ) mg/LNH4NO333 000KNO338 000CaCl2·2H2O8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ)KI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5鐵鹽(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有機成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇20 000ⅣB煙酸100鹽酸吡哆醇(維生素B6) 100鹽酸硫胺素(維生素B1) 20甘氨酸 400以上各種營養成分的用量,除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外,其餘的均為200倍濃縮液。母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配製方法是:每種母液中的幾種成分稱量完畢後,分別用少量的蒸餾水徹底溶解,然後再將它們混溶,最後定容到1 L。母液Ⅲ的配製方法是:將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中,邊加熱邊不斷攪拌使它們溶解,然後將兩種溶液混合,扒蘆並將pH調至5.5,最後定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。各種母液配完後,分別用玻璃瓶貯存,並且貼上標簽,註明母液號、配製倍數、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。MS培養基中還需要加入:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6-苄基嘌呤(6-BA)等植物生長調節物質,並且分別配成母液(0?1 mg/mL)。其配製方法是:分別稱取這3種物質各10 mg,將2,4-D和NAA用少量(1 mL)無水乙醇預溶,將6-BA用少量(1 mL)的物質的量濃度為0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解過程需要水浴加熱,最後分別定容至100 mL,即得質量濃度為0.1 mg/mL的母液。配製培養液 用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的用量:母液Ⅰ為50 mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2,4-D 5 mL、NAA 1 mL,與各種母液一旁亮起放入燒杯中。
『玖』 母液的配置
母液和儲存液差不多,都是高濃度的培養液。在使用的時候按照比例稀釋就能使用了。這樣做的好處是使用方便,防止反復凍融對成份產生不良影響。
比如我們要配製LB培養液,如果這次需要配100ml,我們要把幾種成份一個一個稱量好,定容至100ml。明天又要用100mlLB,我們還要稱量好幾次。這樣很麻煩。不如我們這樣做:配製一瓶100倍濃度的LB母液,用100ml的時候,就取1ml母液,定容到100ml。這個100ml直接能用來培養的就是工作液。母液平時保存在低溫下,因為濃度高所以不怎麼佔地方。所以又叫儲存液。
LB只是舉個例子,事實上我們實驗室很少把LB作為母液儲存的。