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電鏡固定液怎麼配置

發布時間: 2022-05-08 05:17:22

『壹』 用50%的戊二醛溶液如何配製4%戊二醛溶液(掃描電鏡用)

1.
將50%的戊二醛溶液X毫升加入適量的溶劑配製4%戊二醛溶液。
100:50=X:4
50X=100X4
X=400/50
X=8
2.
取50%原溶液8毫升加溶劑到100毫升就配製成了4%戊二醛溶液。
3.
戊二醛,
分子式為C5H8O2,帶有刺激性氣味的無色透明油狀液體,溶於熱水。對眼睛、皮膚和粘膜有強烈的刺激作用。可作為食品工業加工助劑,菌消毒劑、鞣革劑、木材防腐劑,葯物和高分子合成原料等。

『貳』 透射電鏡試樣如何制備

一.取材:組織塊小於1立方毫米

二.固定:2.5%戊二醛,磷酸緩沖液配製固定2小時或更長時間。
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次
1%鋨酸固定液固定2-3小時
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次

三.脫水:50%乙醇15-20分
70%乙醇15-20分
90%乙醇15-20分
90%乙醇 90%丙酮(1:1)15-20分
90%丙酮15-20分
以上在4度冰箱內進行
100%丙酮室溫15-20分三次

四.包埋:純丙酮+包埋液(2:1)室溫 3-4小時
純丙酮+包埋液(1:2)室溫 過夜
純包埋液 37度 2-3小時

五.固化:37度烘箱內 過夜
45度烘箱內 12小時
60度烘箱內 24小時

六.LKB-1型超薄切片機切片 50-60 nm

七.3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色

八.日本電子JEM-1200EX透射電鏡觀察。拍片

『叄』 甲醇和冰乙酸3:1配置固定液作用的原理為什麼現用現配

1、在實驗中使用兩種混和的固定液。由於Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而稱的卡諾氏固定液是效果良好的固定液。

Carnoy固定液(甲醇:冰乙酸=3:l)每次使用前需臨時配製,長時間放置影響固定效果,固定時間15分鍾至24小時,冰箱、室溫均可。

必要時可改變甲醇和冰乙酸的比例,冰乙酸比例增加,利於細胞膨脹、染色體鋪展,但易導致細胞破裂、染色體散失。

2、甲醇與冰醋酸(乙酸)能反應生成乙酸甲酯,所以要現配現用

(3)電鏡固定液怎麼配置擴展閱讀:

1、卡諾氏固定液(Carnoy's Fluid/carnoys fixative)適用於一般植物組織和細胞的固定,常用於根尖、花葯壓片及子房石蠟切片等,有極快的滲透力。

有極快的滲透力,根尖材料固定15—20min即可,花葯則需1h左右,此液固定最多不超過24h,固定後用95%酒精沖洗至不含冰醋酸為止;

2、如果材料不馬上用,需轉入70%酒精中保存。固定液的重要特性是能迅速穿透細胞,將其固定並維持染色體結構的完整性,還要能夠增強染色體的嗜鹼性,達到優良染色效果。

3、乙酸可用作酸度調節劑、酸化劑、腌漬劑、增味劑、香料等。它也是很好的抗微生物劑,這主要歸因於其可使pH降低至低於微生物最適生長所需的pH。

4、甲醇可用作分析試劑,如作溶劑、甲基化試劑、色譜分析試劑。還用於有機合成。

『肆』 透射電鏡灌注固定戊二醛用多大濃度

透射電鏡物品制備步驟
物品, 透射電鏡, 制備步驟

.取材:
組織塊於1立毫米
二.固定:
2.5%戊二醛磷酸緩沖液配製固定2或更間
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三
1%鋨酸固定液固定 2-3
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三
三.脫水:
50%乙醇 15-20
70%乙醇 15-20
90%乙醇 15-20
90%乙醇 90%丙酮(1:1) 15-20
90%丙酮 15-20
4度冰箱內進行
100%丙酮 室溫 15-20三
四.包埋:
純丙酮+包埋液(2:1)室溫 3-4
純丙酮+包埋液(1:2)室溫 夜
純包埋液 37度 2-3
五.固化:
37度烘箱內 夜
45度烘箱內 12
60度烘箱內 24
六.超薄切片機切片 50-60 nm
七.3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色
八.透射電鏡觀察拍片

由於物品含水太電鏡真空蒸發掉破壞結構所需要些能夠水溫取代掉、並且自身沒結構物質樹脂包埋劑物脆弱、結構容易破壞所才需要溫制才復雜物電鏡制主要工作看電鏡倒要物品超薄切片流程圖:

『伍』 肌肉做電鏡掃描,請問樣品的形狀大小有要求嗎,用什麼固定液,需要換液嗎,謝謝啦。

2.5%電鏡專用戊二醛固定液固定後,盡快送電鏡室。

『陸』 電鏡用的固定液可以存放多長時間

透射電鏡物品制備步驟物品,透射電鏡,制備步驟.取材:組織塊於1立毫米二.固定:2.5%戊二醛磷酸緩沖液配製固定2或更間用0.1M磷酸漂洗液漂洗15三1%鋨酸固定液固定2-3用0.1M磷酸漂洗液漂洗15三三.脫水:50%乙醇15-2070%乙醇15-2090%乙醇15-2090%乙醇90%丙酮(1:1)15-2090%丙酮15-204度冰箱內進行100%丙酮室溫15-20三四.包埋:純丙酮+包埋液(2:1)室溫3-4純丙酮+包埋液(1:2)室溫夜純包埋液37度2-3五.固化:37度烘箱內夜45度烘箱內1260度烘箱內24六.超薄切片機切片50-60nm七.3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色八.透射電鏡觀察拍片由於物品含水太電鏡真空蒸發掉破壞結構所需要些能夠水溫取代掉、並且自身沒結構物質樹脂包埋劑物脆弱、結構容易破壞所才需要溫制才復雜物電鏡制主要工作看電鏡倒要物品超薄切片流程圖:

『柒』 求助:電鏡標本怎麼固定

在透射電鏡的樣品制備方法中,超薄切片技術是最基本、最常用的制備技術。超薄如果組織帶有較多的血液和組織液,應先用固定液洗幾遍,然後再切成小塊固定

『捌』 FAA固定液配置方法

FAA固定液配製方法:

配方:福爾馬林(38%甲醛)、5ml冰醋酸、5ml70%、酒精90ml、5ml甘油(丙三醇)。

將上述液體混合即可。

固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦味酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。

FAA固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液或AAF、AAF固定液,主要由乙醇(A)、乙酸(A)、甲醛(F)組成,兼有脫水作用。AAF固定液常用於快速脫水和固定以及冷凍切片的快速固定。

(8)電鏡固定液怎麼配置擴展閱讀:

FAA固定液注意事項:

1、AAF固定液對人體有一定的損害,請在通風好的環境下小心操作,避免吸入。

2、固定液pH最好接近用中性,pH范圍6~8。

3、組織取材的厚度不同,固定時間也不同,對組織恰當的選材有利於固定液的滲透。常規活

檢組織比較適合的厚度為2~4mm,一般不超過6mm。

4、溫度對固定的影響很明顯,提高溫度可以加速固定作用,但溫度不宜過高。

5、取出新鮮組織後,應及時固定,無法及時固定時,應保存於生理鹽水中及時送檢。

『玖』 透射電鏡樣品制備方法是什麼

透射電鏡試樣制備:

一、實驗內容及目的:了解透射電鏡對試樣的要求,熟悉透射電鏡試樣的制備過程,制備一個合格的透射 電鏡試樣。

二、薄膜樣品的制備:用於透射電鏡下觀察的試樣厚度要求在50-200nm 之間,對於不導電的陶瓷材料和脆性材料,最終減薄可採用離子減薄法。

該法是用離子束在樣品的兩側以一定的傾角(5-30)轟擊樣品,使之減薄。由於陶瓷樣品硬度高,耐腐蝕,因此,離子減薄的時間長。對於要求較高的金屬薄膜樣品,在雙噴後再進行一次離子減薄,效果會更好。

預減薄

預減薄的目的在於使圓片的中心區域進一步減薄,以確保最終在圓片的中心部位穿孔(其邊緣附近區域可供觀察),預減薄通常採用專用的機械研磨機,使中心區域減薄至約10μm厚,藉助於微處理器控制的精密研磨有時可以獲得使電子束透明的厚度(<1μm).有時也用化學方法進行預減薄。

以上內容參考:網路-樣品制備

『拾』 做電鏡固定,25%戊二醛怎麼稀釋到2.5

做電鏡固定,25%戊二醛怎麼稀釋到2.5
透射電鏡物品制備步驟
物品, 透射電鏡, 制備步驟

.取材:
組織塊於1立毫米
二.固定:
2.5%戊二醛磷酸緩沖液配製固定2或更間
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三
1%鋨酸固定液固定 2-3
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三
三.脫水:
50%乙醇 15-20
70%乙醇 15-20
90%乙醇 15-20
90%乙醇 90%丙酮(1:1) 15-20
90%丙酮 15-20
4度冰箱內進行
100%丙酮 室溫 15-20三
四.包埋:
純丙酮+包埋液(2:1)室溫 3-4
純丙酮+包埋液(1:2)室溫 夜
純包埋液 37度 2-3
五.固化:
37度烘箱內 夜
45度烘箱內 12
60度烘箱內 24
六.超薄切片機切片 50-60 nm
七.3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色
八.透射電鏡觀察拍片

由於物品含水太電鏡真空蒸發掉破壞結構所需要些能夠水溫取代掉、並且自身沒結構物質樹脂包埋劑物脆弱、結構容易破壞所才需要溫制才復雜物電鏡制主要工作看電鏡倒要物品超薄切片流程圖: