『壹』 無血清細胞培養基是怎麼出現的
無血清細胞培養基是怎麼出現的
目前，血清仍是動物細胞培養中最基本的的添加物，尤其是在原代培養或者細胞生長狀況不良時，常常會先使用有血清的培養液進行培養，待細胞生長旺盛以後，再換成無血清培養液。細胞轉入無血清培養基培養要有一個適應過程，一般要逐步降低血清濃度，從10%減少到5%，3%，1%，直至無血清培養。在降低過程中要注意觀察細胞形態是否發生變化，是否有部分細胞死亡，存活細胞是否還保持原有的功能和生物學特性等。在實驗後這些細胞一般不再繼續保留，很少有細胞能夠長期培養於無血清培養基而不發生改變的。細胞轉入無血清培養之前，要留有種子細胞，種子細胞按常規培養於含血清的培養基中，以保證細胞的特性不發生變化。
為了使細胞適應無血清培養，關鍵的是使所培養細胞：
1.處於對數生長中期
2.>90%
活細胞率
3.適應時以較高的起始細胞接種
細胞適應無血清培養基的方法
1.直接適應——細胞從添加血清的培養基轉換到無血清培養基（SFM）中。
一些類型細胞可直接從包含血清的培養基適應無血清培養基。對於直接適應，接種細胞密度應該:2.5×10~3.5×10細胞/ml。當細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml時，傳代培養細胞。當細胞密度在培養4到7天後達到2×10~4×10細胞/ml時，細胞完全適應了無血清培養基。每隔3~5天，當細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml，細胞活率在90%時，貯備的適應了無血清培養基的細胞培養物應該再次傳代培養。
2.連續適應——分好幾步把細胞從添加血清的培養基轉換到無血清培養基（SFM）中，與直接適應相比較，連續適應趨向對於細胞更加溫和一些。
（1）以2倍正常接種密度接種生長活躍的細胞培養物到75%有血清培養基：25%SFM
混合培養基中，傳代培養。
（2）當細胞密度>5×10細胞/ml時，以2×10到3×10細胞/ml細胞密度，在有血清培養基：SFM為50∶50的混合培養基中傳代培養。
（3）以2×10到3×10細胞/ml細胞密度，25%有血清培養基和75%
SFM中傳代培養。
（4）當細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml（接種後4到6天），在100%SFM培養基中傳代培養。
（5）每隔3到5天，當細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml，細胞活率在90%時，貯備的適應了無血清培養基的細胞培養物應該再次傳代培養。
建議備份前一次混合培養的培養物，直到每一次細胞適應了新的混合培養基。每一次減少血清前，可能需要在SFM/有血清混合培養基中進行幾次傳代。
在適應過程中，最好不要讓細胞生長過度。這將增加選擇亞群的可能性。需要注意，與有血清培養基相比，大部分SFM包含非常少的蛋白質，因而更易於受外界因素的影響。
細胞培養適應替代血清：許多細胞利用連續適應方法能很好的適應，用包含FBS的的培養基和包含有替代血清的培養基1∶1（v∶v）的混合培養基培養細胞。通過下列的混合培養基的方式，連續幾代減少當前培養基的量：1∶2，1∶4，1∶16和100%替代培養基。每次適應改變血清比例時，傳代細胞2到3次。
培養可以直接從FBS轉換到替代血清。一開始就使用相同於FBS的濃度的替代物或血清，生長的延遲可能會發生，4允許進行2到3次的傳代，使生長率恢復到以前的水平。
特別需要強調的是：配製無血清培養液必須使用高質量的水，如石英玻璃蒸餾器經三次蒸餾或超純水凈化裝置制備的水。因為無血清培養基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保護細胞的大分子，既便水中的有毒物質含量甚微，也可能對細胞產生致死性損害。這是無血清培養能否成功的關鍵因素之一。
『貳』 求助，有人用無血清培養基養細胞嗎
無血清培養基是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養基。無血清培養基的基本配方為基礎培養基及添加組分兩大部分。 無血清培養基可避免血清批次間的差異影響，提高細胞培養和實驗結果的重復性，減少血清對細胞的毒性作用和血清源性污染，減少了血清中蛋白對某些生物測定的干擾，便於對實驗結果的分析。基於無血清培養基以上的優勢，ScienCell實驗室根據不同細胞的生長特性研發了不同種類的無血清培養基。ScienCell無血清培養基列表如下：
1111 SMCM-sf 平滑肌細胞培養基
1511 NPrCM 神經前體細胞培養基
1521 NM 神經細胞培養基
1601 OPCM 少突膠質前體細胞培養基
1611 OsM 球狀少突細胞培養基
2101 KM 角質細胞培養基
2111 KM-d 角質細胞培養基（確定）
2311 FM-sf 成纖維細胞培養基
2561 TEpiCM 扁桃體上皮細胞培養基
2611 OKM 口腔角質細胞培養基
2951 CoEpiCM 結腸上皮細胞培養基
3211 BEpiCM 支氣管上皮細胞培養基
3231 SAEpiCM 小氣管上皮細胞培養基
4121 EpiCM-2 上皮細胞培養基-2
4321 UCM 尿道上皮細胞培養基
4411 PEpiCM 前列腺上皮細胞培養基
5501 HemGM 造血細胞培養基
5801 STEMium 人胚胎幹細胞無血清培養基
5811 STEMium-XF 無異種人胚胎幹細胞生長培養基
5881 MEF-cm 小鼠胚胎成纖維細胞培養基
5891 bFGF-std MEF-cm 鹼性成纖維細胞生長因子刺激的小鼠胚胎成纖維細胞條件培養基
5911 CSM 心肌細胞選擇性培養基
5931 PSCNIM 多功能幹細胞神經誘導培養基
6511 CEpiCM 角膜上皮細胞培養基
7311 OEpiCM 卵巢上皮細胞培養基
7511 MSCM-sf 間充質幹細胞培養基
7611 MEpiCM 乳腺上皮細胞培養基
細胞轉入無血清培養基培養要有一個適應過程，一般要逐步降低血清濃度，直至無血清培養。在降低過程中要注意觀察細胞形態是否發生變化，是否有部分細胞死亡，存活細胞是否還保持原有的功能和生物學特性等。
ScienCell無血清培養基，是經滅菌的液體培養基，包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質。每套包含500毫升基礎液，5毫升細胞生長添加物，5毫升雙抗，混勻後即為完全培養基。每一款專用培養基均搭配特定類型的細胞生長添加物成分，為細胞的傳代和生長提供最佳環境。
『叄』 求助，無血清培養基如何讓細胞貼壁
無血清培養基如何讓細胞貼壁
細胞培養不用血清，凍存可以用無血清凍存液 配方為細胞條件無血清培養基與含10%二甲基亞碸的新鮮的無血清培養基1比1混勻 凍存過程： 消化貼壁細胞或收集懸浮細胞，將細胞懸液收集至離心管並1000rpm離心10分鍾，棄上清液 用一定量凍存液將細胞重懸，計數並調整細胞密度至100個每毫升左右 將細胞懸液分裝至2ml凍存管中，每管1ml並將凍存管口封，貼上標簽做好記錄 降溫： 4度1小時，負20度1小時，負80度18小時或隔夜，液氮
『肆』 無血清培養基配方，無血清細胞培養基，什麼是無血清
在培養動物細胞的時候培養基中加入血清，是因為血清成分復雜，含有的一些動物細胞生長必須的物質成分尚未完全解讀。無血清則意味著用更清晰的物質配方來製作培養基，成分是完全明確的。
『伍』 我的細胞培養不用血清，凍存要怎麼樣
細胞培養不用血清，凍存可以用無血清凍存液
配方為細胞條件無血清培養基與含10%二甲基亞碸的新鮮的無血清培養基1比1混勻
凍存過程：
消化貼壁細胞或收集懸浮細胞，將細胞懸液收集至離心管並1000rpm離心10分鍾，棄上清液
用一定量凍存液將細胞重懸，計數並調整細胞密度至100個每毫升左右
將細胞懸液分裝至2ml凍存管中，每管1ml並將凍存管口封，貼上標簽做好記錄
降溫：
4度1小時，負20度1小時，負80度18小時或隔夜，液氮
『陸』 無血清培養基有什麼優缺點，主要在哪些方面應用
優點：
①提高了細胞培養的可重復性，避免了由於血清批次之間差異的影響，
②減少了由血清帶來病毒、真菌和支原體等微生物污染的危險，
③供應充足、穩定，
④細胞產品易於純化，
⑤避免了血清中某些因素對有些細胞的毒性，⑥減少了血清中蛋白對某些生物測定的干擾，便於對實驗結果的分析。
缺點：
①細胞在無血清培養基中易受某些機械因素和化學因素的影響，培養基的保存和應用不如傳統的合成培養基方便，
②成本較高，
③針對性強，一種無血清培養基僅適合某一類細胞的培養。
應用於蛋白生產用細胞的培養