① 什麼是外泌體保存液，外泌體保存液介紹
外泌體(exosomes)是一種由活細胞分泌，直徑在30-150nm，具有雙層脂質膜結構的小囊泡，它在機體內廣泛存在，如外周血、腹水、尿液、唾液、腦脊液等各種體液中，內含豐富的蛋白質、脂質以及核酸等生物活性成分。外泌體參與物質運輸，還攜帶和傳遞重要的生物信息，在介導免疫抗原遞呈、樹突狀細胞的活化、神經退行性疾病發生、腫瘤細胞抗原的轉移及腫瘤診斷治療中發揮重要作用，吸引了很多科研人員的關注，在深入研究外泌體前，外泌體的提取純化、鑒定及合理保存是首要的步驟，也是一切後續實驗的基礎，只有高活性、高穩定性的外泌體才能確保後續實驗的質量和可信度。
目前外泌體只能在2～8℃穩定保存3天，-20℃穩定保存1個月。長期保存需要-80℃低溫，並且不能凍融，存儲條件要求高，這些缺點影響了外泌體的深入研究。
由此，有效保持外泌體的完整性、生物活性和內含物穩定性的外泌體保存液仍有待開發。
② 外泌體細胞保存液是做什麼的
細胞保存液起到保持、固定細胞原形態結構的作用，是病理細胞診斷基礎，因為如果細胞形態結構發生變化，可能會帶來診斷結果的誤差，所以需要細胞保存液進行固定細胞形態，細胞保存液也是液基細胞試劑的核心構成。
液基薄層細胞製片檢查系統處理技術誕生於1991年美國等國家，率先應用於婦科細胞學檢查，國內從2001年開始作液基細胞學篩查宮頸癌的研究，使該項技術得到迅速發展，被稱之為一場細胞學製片技術的革命。
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細胞保存液適用於宮頸脫落細胞檢查、胸腹水脫落細胞檢查、尿沉渣檢查、痰液脫落細胞檢查、針吸細胞檢查，基本上病理科、婦科、內科、外科、泌尿科等科室會用到。液基薄層胞學檢測技術特別適用於所有的女性的宮頸癌的早期診斷,是一項非常值得推廣應用的臨床檢驗技術。
脫落細胞保存液適用於各類脫落細胞如宮頸粘液、陰道分泌物、痰、鼻咽分泌物及其它粘稠性標本的處理，以佳效果進行細胞形態學檢查，可以溶解、去除各類脫落細胞標本中影響顯微鏡下可見的粘液、雜質，便於病理學及細胞學檢查。
液基細胞檢測試劑盒主要由細胞保存液、細胞裂解液、提取液、稀釋液、消化酶、防腐劑等及必要的細胞承載或製片器具組成，用於臨床檢驗分析前細胞或微生物的保存、運輸、提取、分離、沉澱、固定、製片等，用於各類脫落細胞如宮頸粘液、陰道分泌物等標本的處理，以佳效果進行宮頸癌篩查、炎症、HPV滴蟲、黴菌等細胞形態學檢查。
綜上所述，細胞保存液是液基細胞檢測試劑盒的成分之一，主要作用是為了保存和穩固細胞。
③ 什麼是外泌體保存液
Exosome樣本是進行有關外泌體的實驗的基礎，很多童靴認為這是最簡單的。如果你真的這么認為，那麼就大錯特錯了。收集樣本有不同的要求，一個比一個重要。那該如何去選擇我們的實驗樣本？取樣的時候又該注意些什麼？分離好後的外泌體又如何保存呢？
一、外泌體樣本的選擇和注意事項
實驗樣本不同在收集的時候需要注意的點不同。你研究的是哪種樣本，需要特別注意哪些方面呢？看以下闡述：
1、細胞上清
選用細胞培養上清作為分離外泌體的實驗材料不會像血樣等存在樣本量限制的問題，而且操作簡單，直接離心即可。但在細胞培養過程中需注意污染、培養時間、細胞死亡率及FBS的問題。和所有的細胞實驗一樣，培養過程中不允許有污染，但有些培養細胞本身帶有病毒基因組，在培養過程中會釋放出病毒顆粒，這就要衡量病毒顆粒是否會影響後續實驗。
一般培養24-48h後細胞即可分離外泌體，在特殊情況下，如在培養基中添加特殊的化學物質，培養15-60min即可收集。因細胞死亡會分泌小體，所以在研究外泌體時細胞的死亡率一定要控制 5% 之內。未經處理的FBS中含有大量的外源外泌體，所以細胞培養一定要用經過處理不含外泌體的FBS。
2、唾液
唾液的成分會因取樣的位置和時間不同而不同，所以同血樣一樣需定點定時。唾液主要由舌下腺，頜下腺及腮腺3個腺體分泌，所以不同位置的唾液成分不同，在收集的時候需固定位置或是收集所有的唾液。不同時間段的唾液成分也會不一樣，所以也需定時取。其他如吸煙進食都是禁止的，一般建議采樣1h之內不能有進食行為，包括飲料，且不要劇烈運動，在平息狀態下取樣。最後一點，不能刷牙。
3、血液
在第一次外泌體課程的時候，就有許多同學問到關於血清和血漿選擇的問題，那到底應該選哪個呢?血漿=血液-血細胞 血清=血漿-纖維蛋白原-凝血因子
分不清楚兩者的弄清血清的來源就能牢牢記住啦。血清是血液凝固之後收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原，凝血因子，以及多了很多凝血產物。纖維蛋白原可轉化為纖維蛋白，具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體，有研究發現血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。所以一般實驗選擇血漿，在特殊情況下，如研究與血小板相關的疾病的時候，當然是血清更適合。
受限於樣本，血樣一般取2ml。那取血樣的時候有什麼注意的地方呢？在外泌體的血樣研究中，經常被忽略的一個問題就是針頭的大小。在抽血過程中，血液流經針頭的時候會產生剪切力，若針頭太細，剪切力較大，會使細胞破碎或刺激血小板分泌外泌體，從而影響後續的實驗。有些文獻報道21號針頭的大小比較合適作為外泌體研究的血樣收集。其他諸如采血的位置，人的生理周期，飲食周期及時間周期（24h）等都會影響樣品中的外泌體。所以取樣的時候盡量定點定時。最後還需注意，盡量在采血30min內處理樣本，因血液收集在收集管中時，血細胞和血小板還會分泌外泌體。
4、鼻涕
研究鼻涕有一個特殊的價值，其可以探索治療性外泌體。啥是治療性外泌體？在腦部的疾病治療中，葯物可以外泌體的方式注射到鼻腔，這樣葯物就可以避開血腦屏障。鼻涕的收集與許多環境因素相關，如年齡、季節、性別 、城市、過敏史及職業風險。鼻涕的收集方法沒有統一標准，只需保證所有樣本取樣方法一致即可。
5、尿液
在尿液的取樣中，除性別、年齡、進食等影響外，還有一個特殊的點即是尿液的新鮮程度，這個新鮮度指的是尿液在膀胱中存在的時間。
6、乳汁
乳汁中存在的外泌體、抗體等會影響新生兒的發育，具有較大的研究價值。泌乳的階段、 胎次、膳食、泌乳量、是否是母乳喂養、母親的健康狀態、精神狀態等都會影響外泌體的分泌。需要注意的是乳汁中含有大量的脂蛋白，會對後面分離外泌體產生影響。
7、腦脊液
腦脊液研究面臨的困難主要在樣本的獲取及樣本中外泌體豐度少，有木有一種雪上加霜的感覺。那這個問題如何解決？國外可購買商業正常樣本或者使用其他疾病樣本作為對照。
二、外泌體的保存
對於外泌體的保存，和其他分子樣品一樣，提取的外泌體低溫保存即可，短時間（一周之內）可放4度，長時間放-20或-80。也有人認為放4度更好，怕低溫凍融會影響外泌體的完整性，但目前還沒有一個定論，而且大部分文獻認為沒有影響。那到底放幾度呢？有一招，分裝放-20或-80，是不是妥妥的。
④ 什麼是外泌體保存液，外泌體保存液介紹
外泌體的實驗的基礎，很多童靴認為這是最簡單的。如果你真的這么認為，那麼就大錯特錯了。收集樣本有不同的要求，一個比一個重要。那該如何去選擇我們的實驗樣本？取樣的時候又該注意些什麼？分離好後的外泌體又如何保存呢？
一、外泌體樣本的選擇和注意事項
實驗樣本不同在收集的時候需要注意的點不同。你研究的是哪種樣本，需要特別注意哪些方面呢？看以下闡述：
1、細胞上清
選用細胞培養上清作為分離外泌體的實驗材料不會像血樣等存在樣本量限制的問題，而且操作簡單，直接離心即可。但在細胞培養過程中需注意污染、培養時間、細胞死亡率及FBS的問題。和所有的細胞實驗一樣，培養過程中不允許有污染，但有些培養細胞本身帶有病毒基因組，在培養過程中會釋放出病毒顆粒，這就要衡量病毒顆粒是否會影響後續實驗。
一般培養24-48h後細胞即可分離外泌體，在特殊情況下，如在培養基中添加特殊的化學物質，培養15-60min即可收集。因細胞死亡會分泌小體，所以在研究外泌體時細胞的死亡率一定要控制 5% 之內。未經處理的FBS中含有大量的外源外泌體，所以細胞培養一定要用經過處理不含外泌體的FBS。
2、唾液
唾液的成分會因取樣的位置和時間不同而不同，所以同血樣一樣需定點定時。唾液主要由舌下腺，頜下腺及腮腺3個腺體分泌，所以不同位置的唾液成分不同，在收集的時候需固定位置或是收集所有的唾液。不同時間段的唾液成分也會不一樣，所以也需定時取。其他如吸煙進食都是禁止的，一般建議采樣1h之內不能有進食行為，包括飲料，且不要劇烈運動，在平息狀態下取樣。最後一點，不能刷牙。
3、血液
在第一次外泌體課程的時候，就有許多同學問到關於血清和血漿選擇的問題，那到底應該選哪個呢?血漿=血液-血細胞 血清=血漿-纖維蛋白原-凝血因子
分不清楚兩者的弄清血清的來源就能牢牢記住啦。血清是血液凝固之後收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原，凝血因子，以及多了很多凝血產物。纖維蛋白原可轉化為纖維蛋白，具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體，有研究發現血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。所以一般實驗選擇血漿，在特殊情況下，如研究與血小板相關的疾病的時候，當然是血清更適合。
受限於樣本，血樣一般取2ml。那取血樣的時候有什麼注意的地方呢？在外泌體的血樣研究中，經常被忽略的一個問題就是針頭的大小。在抽血過程中，血液流經針頭的時候會產生剪切力，若針頭太細，剪切力較大，會使細胞破碎或刺激血小板分泌外泌體，從而影響後續的實驗。有些文獻報道21號針頭的大小比較合適作為外泌體研究的血樣收集。其他諸如采血的位置，人的生理周期，飲食周期及時間周期（24h）等都會影響樣品中的外泌體。所以取樣的時候盡量定點定時。最後還需注意，盡量在采血30min內處理樣本，因血液收集在收集管中時，血細胞和血小板還會分泌外泌體。
4、鼻涕
研究鼻涕有一個特殊的價值，其可以探索治療性外泌體。啥是治療性外泌體？在腦部的疾病治療中，葯物可以外泌體的方式注射到鼻腔，這樣葯物就可以避開血腦屏障。鼻涕的收集與許多環境因素相關，如年齡、季節、性別 、城市、過敏史及職業風險。鼻涕的收集方法沒有統一標准，只需保證所有樣本取樣方法一致即可。
5、尿液
在尿液的取樣中，除性別、年齡、進食等影響外，還有一個特殊的點即是尿液的新鮮程度，這個新鮮度指的是尿液在膀胱中存在的時間。
6、乳汁
乳汁中存在的外泌體、抗體等會影響新生兒的發育，具有較大的研究價值。泌乳的階段、 胎次、膳食、泌乳量、是否是母乳喂養、母親的健康狀態、精神狀態等都會影響外泌體的分泌。需要注意的是乳汁中含有大量的脂蛋白，會對後面分離外泌體產生影響。
7、腦脊液
腦脊液研究面臨的困難主要在樣本的獲取及樣本中外泌體豐度少，有木有一種雪上加霜的感覺。那這個問題如何解決？國外可購買商業正常樣本或者使用其他疾病樣本作為對照。
二、外泌體的保存
對於外泌體的保存，和其他分子樣品一樣，提取的外泌體低溫保存即可，短時間（一周之內）可放4度，長時間放-20或-80。也有人認為放4度更好，怕低溫凍融會影響外泌體的完整性，但目前還沒有一個定論，而且大部分文獻認為沒有影響。那到底放幾度呢？有一招，分裝放-20或-80，是不是妥妥的。
⑤ 外泌體保存液是什麼
外泌體(exosomes)是一種由活細胞分泌，直徑在30-150nm，具有雙層脂質膜結構的小囊泡，它在機體內廣泛存在，如外周血、腹水、尿液、唾液、腦脊液等各種體液中，內含豐富的蛋白質、脂質以及核酸等生物活性成分。外泌體參與物質運輸，還攜帶和傳遞重要的生物信息，在介導免疫抗原遞呈、樹突狀細胞的活化、神經退行性疾病發生、腫瘤細胞抗原的轉移及腫瘤診斷治療中發揮重要作用，吸引了很多科研人員的關注，在深入研究外泌體前，外泌體的提取純化、鑒定及合理保存是首要的步驟，也是一切後續實驗的基礎，只有高活性、高穩定性的外泌體才能確保後續實驗的質量和可信度。
目前外泌體只能在2～8℃穩定保存3天，-20℃穩定保存1個月。長期保存需要-80℃低溫，並且不能凍融，存儲條件要求高，這些缺點影響了外泌體的深入研究。
由此，有效保持外泌體的完整性、生物活性和內含物穩定性的外泌體保存液仍有待開發。