① 甘油保存菌种的方法
准备材料:甘油保存菌种时,准备甘油、离心管、枪头的工具并消毒灭菌。 调配比例:根据菌种调配甘油,一般甘油和菌液的比例是20:80。 控制温度:根据冷藏时间使温度在零下20度或零下70度。 注意事项:严格控制温度。
甘油保存菌种的方法及步骤
1、准备材料
甘油保存菌种时,首先要根据需要保存的菌种,准备足够的甘油、离心管、枪头的工具,其中离心管要准备2ml容量大小,将准备好的工具放在121度的环境中消毒灭菌20分钟。
2、调配比例
根据菌种调配甘油,采用20%的甘油来保存菌种,那么甘油和菌液的比例就是20:80,菌种不同甘油的比例也不同,例如链球菌属保存时,除了甘油还需要少量的生理盐水制作保存液。
3、控制温度
将纯化后的菌种放入调配好的甘油保存液中,放在零下20度或者零下70度的环境中冷藏,温度不同保存的时间长短也不一样,零下20度的最多只能保存1年,而零下70度的保存时间为2-4年。
4、注意事项
甘油保存菌种时,必须要经过消毒灭菌,严格控制冷藏的环境温度,以免出现菌种死亡或者被污染,另外用来保存的菌种与标准菌菌株的特性不同,冷冻的降温速度要保持在1度/分钟。
② 用甘油保存真菌需要多大的比例
我这里一般是需要用到质粒的大肠杆菌用15%的甘油1:1 和菌液混合,酵母用的是30... 的比例加入菌液和甘油,一定要混匀,然后放在-70 度冰箱中保存。
③ 细菌甘油保存法是在什么容器中保存50%甘油如何配置
ep管或小试管均可,
配置;蒸馏水和甘油一比一混合即可
视设备条件而定
,两种方法都行,我比较倾向于第二种方法,它有利于控制杂菌感染
④ 甘油如何冷藏细菌,具体的操作步骤是什么希望能分条列出来。
1、配制30%(体积分数)的甘油水溶液,离心管若干 灭菌备用。
2、将细菌用富集培养基摇瓶培养过夜,根据保藏要求(有些要求高的项目中菌要达到一定OD值)培养。
3、将菌液和灭菌的甘油水溶液按照2:1的体积比例在离心管中混匀(使最终甘油浓度为10%,其实甘油多点也没关系),-70°冰箱保存。
⑤ 甘油菌保藏的甘油最终浓度为多少
常用的是终浓度 10-30% 的甘油。
由于纯甘油十分粘稠,很难定量,一般配成终浓度 50% 的水溶液,高压灭菌后室温保存即可。使用时按 50% 甘油:菌液 = 1:1 混合均匀,然后迅速冻结。
A. 先把甘油稀释成50%,然后灭菌
这样20%的终浓度用400微的菌体加600微的50%甘油混合不就可以啦
纯的甘油太粘稠啦,用枪不好吸的 B 终浓度15%。甘油配成80%的浓度,到时候加800微升菌体,200微升甘油就好。
⑥ 加甘油保菌要不要混匀
纯甘油高压灭菌后分装-20℃保存待用;
离心管单独灭菌;
我们保存菌种时取800微升的菌液置于离心管中,再取分装好的纯甘油200微升与菌液混合,剧烈震荡,充分混匀,置-20℃或-80℃保存均可.
⑦ 甘油菌保藏的甘油最终浓度为多少
将拟保藏菌种对数期的培养液直接与经121℃蒸汽灭菌20min的甘油混合,并使甘油的终浓度在10%~15%,再分装于小离心管中,置低温冰箱中保藏。基因工程菌常采用本法保藏。
⑧ 甘油如何保菌
甘油保存菌种:取需要保存菌种的菌液与80%灭菌之后的甘油按照菌液:甘油=5:2的比例混合,零下70度保存(零下20度保存时间较短)。
甘油管冷冻保藏法是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。
灭菌之后的甘油与菌种混合之后可以选择零下20度保存或者零下70度保存,一般实验室选择零下20度保存就可以了,零下20度保存时间可以达到一年左右,零下70度保存的时间更久,当然保存条件也更为苛刻,针对一般实验室来说取用也不方便。
(8)丙三醇保菌液怎么配置扩展阅读:
其他保存菌种的方法
传代培养保藏法:简单来说就是将菌种接种在固体斜面培养基上,包上报纸或者油皮纸放入2-8度的条件下保存,可以随时取用,随时观察菌种生长情况。
液体石蜡覆盖保藏法:是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,保证在培养基水分蒸发的时候避免菌种死亡,此外因液体石蜡的密封性还可以避免菌种接触氧气,导致菌种代谢加快。
⑨ 丙三醇(分析纯)怎么配置5mol/L丙三醇的溶液,需要多少毫升的丙三醇(分析纯)
丙三醇的分子式为 C3H8O3,分子量为92.09, 20℃时的密度为1.26331g/mL
20℃时15mol丙三醇的体积为:15×92.09/1.2633=1093.4(mL)
量取1093.4毫升20℃的丙三醇(分析纯),加水稀释至1升,即得5mol/L的丙三醇溶液。
唉,下次不要再把数据搞错了!