‘壹’ 营养液母液的制备5大步骤
4RN的+ + 2nH2O电解4R + NO2 + 4NH +
4M 22.4n?
?M V
?所以N = 4MV/22.4m
‘贰’ 培养基母液配制的方法如何
配制培养基是花卉组织培养的首要环节。培养基的成分随着花卉的种类、不同的外植体、不同的培养阶段应当有所不同。一般来说,各种培养基都有大量元素、微量元素、维生素、激素、糖和琼脂等物质,有时还要在培养基里添加有机附加物,如活性炭、香蕉汁、椰子汁等。在生产上,首先选用已有的培养基配方,它是前人研究的成果,又是经过生产实践验证的。现在几乎各种花卉用的营养基配方都有,可以免去您再研究的麻烦,当然在生产实践中,也可适当改进。如果您找不到合适的配方,可先试用MS培养基,MS是Murashige和Skoog的缩写,他们二人于1962年研究出来了这种培养基。下面以MS培养基为例,介绍怎样配制。
(1)配制母液。把培养基中的必需元素按原配方量的50倍、100倍或1000倍称量后制成一种浓溶液,这种浓溶液叫母液。在配制培养基时按比例分别量取母液稀释到所需的浓度即可。母液配好后贴上标签,放在0~4℃的冰箱中,可使用半年到1年,这样做可节省许多时间。可能产生化学反应的或溶解后产生沉淀的,不能放在同一个容器中。配制母液要用重蒸馏水。药物要使用分析纯或等级较高的化学纯。药物的称量和药液的定容都要准确。
母液①:硫酸镁18.5克,硝酸铵82.5克,硝酸钾95.0克。加水定容到1000毫升,浓度为培养基的50倍,配1升培养基时量取20毫升母液。
母液②:氯化钙22.0克。加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。
母液③:磷酸二氢钾8.5克。加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。
母液④:乙二胺四乙酸二钠3.73克,硫酸亚铁2.78克。加水定容到1000毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。
母液⑤:硼酸620毫克,硫酸锰2230毫克,硫酸锌860毫克,硫酸铜2.5毫克,碘化钾83毫克,钼酸钠25毫克,氯化钴2.5毫克。加水定容到1000毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。
母液⑥:肌醇5克,甘氨酸100毫克,烟酸25毫克,盐酸吡哆醇25毫克,盐酸硫胺素5毫克。加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。
(2)配制培养基。配制每1000毫升培养基,称取6~10克琼脂作凝固剂,具体按配方要求称量,放在水浴锅上慢慢溶解。先在量筒内放入一定量的水,按照母液顺序和规定量,量取母液。当母液加完后,根据需要每升培养基再加入生长调节物质如吲哚乙酸或萘乙酸等,细胞分裂素类0.04~10毫克,细胞分裂素应用最多的是6-苄基腺嘌呤,加完后倒入已熔化的琼脂中。每1000毫升培养基加入蔗糖30克或根据要求确定,定容到所需的体积。继续加温,直到琼脂完全熔解。用盐酸或氢氧化钠对培养基的pH进行调节,多数培养基的pH在5.4~6.0之间,MS培养基的pH为5.7。
将配好的培养基趁热倒入培养容器中,培养基占容器体积的1/3~1/4。不要将培养基沾到容器壁上,否则容易被杂菌感染。然后及时加盖,进行高压灭菌,灭菌时要按高压灭菌锅的操作规程使用。在121℃、压力111千帕下维持15~20分钟,温度和时间都要严格控制。到时间后立即切断电源,当高压锅内压力降到常压后,开启放气阀,打开锅盖,取出灭菌好的培养基,放在接种室中培养3天,没被感染后才能用来组织培养。
‘叁’ tnfα的母液怎么配置
TNFα是一种细胞因子,对免疫系统具有重要作用。人们通常需要针对TNFα进行研究,因此需要一定浓度的TNFα母液。TNFα母液的配置需要一定的实验室技能,下面将详细介绍:
首先,要将TNFα制正铅剂溶解在适当的溶剂中。常用的溶剂是1 mg/ml的无菌PBS。将TNFα与PBS混合均匀,直到其完全溶解。
接下来,对所配置的TNFα母液进行过滤答清答。使用0.2微米的无菌滤器,清慧将溶液过滤,以去除任何杂质和细菌。过滤完成后,将TNFα母液分装到小体积管中,并冻存。冷冻后的TNFα母液可以在-80℃下保持稳定性,直到需要使用时,可以在冰上缓慢解冻。
总之,配置TNFα母液需要谨慎地进行实验,确保它的纯度和浓度,以便在后续的实验中使用。纯手打,望采纳!
‘肆’ 1M Trus PH值6.8怎么配制
般先配置1M母液用候稀释10mM.
参考:1 M Tris buffer(缓冲范围pH7.0-8.5) 1L
1称取121.1 g Tris-Base加入700 ml双蒸水放置转旋转混合溶庆庆解,
2pH计校准Tris-Base完全溶解加入浓盐酸配春进行酸度调节(加入浓盐酸温度升高)调至接近目pH观察温度变化并用加热(水浴微波)或冰浴调节温度至25 ℃±0.2 ℃使温度25 ℃±0.2 ℃刚达所需pH值(pH值允许误差±0.01)
3pH值调节完毕用容量瓶定容至培差耐1 L0.45μm滤膜滤倒入试剂瓶保存标记期名称
4配1 L pH8.0Tris约需要42 ml浓盐酸
1M Trus PH值6.8怎么配制
感觉提问主意不是很清晰
‘伍’ 急!植物组织培养的母液计算。
对于2000ml的培养基应该是这样配制的:
所谓1/2MS,指的是大量元素母液,正常的我们应该加入2000除以20即100ml的体积,因为是1/2MS,所以只需要加入50ml;微量元素母液加入:2000/100=20ml;铁盐母液2000/100=20ml;有机物母液2000/100=20ml;6BA加入4ml,就是4mg,NAA是0.2ml.蔗糖就是2000乘以3.0 %就是60g,琼脂为2000乘以0.8 %就是16g
‘陆’ 培养基中母液的配制有哪几种方法
培养基的配制应遵循一定的方法和程序,如果每次配制都要按着成分表依次称量,既费时,又增加了多次称量的误差。
为了提高配制培养基的工作效率,一般将常用的基本培养基先配制成10倍或100倍液或更高倍数的贮备液或母液(stocksolution)。
母液的配制常常有两种方法。一是将培养基的每个组分配成单一化合物母液,一是配成几种不同化合物的混合母液。
前者便于配制不同种类的培养基,后者在大量配制同种培养基时省时、省力。以MS培养基配制为例,说明母液配制过程中应注意的问题。该配方中除了蔗糖和琼脂外,还包括有19种成分,其中大多数化合物带有若干水分子,如果是用不同水分含量的同种化合物代替,则须重新计算其正确用量。通常配制四种贮备母液:大量元素(浓缩20倍)、微量元素(浓缩200倍)、铁盐(浓缩200倍)、除蔗糖外的有机物质(浓缩200倍)。在制备这几种母液时,要避免发生沉淀,通常把每种试剂单独溶解后(尤其是CaClsubscript2subscript,易与SOsuperscript2-、POsuperscript3-形成硫酸钙或磷酸钙的不溶物),再与别的也已经完全溶解的药品混合,混合已溶解的各种无机盐时还应注意先后顺序。Fesuperscript2+superscript易与某些阴离子形成沉淀而失效,故铁元素需单独配制成螯合铁母液。
各种生长调节物质的母液应分别配制,应先把它们溶解在很少量的适当溶剂中,可加热助溶,然后再加水定容。母液的浓度一般宜配制成1mmolL或10mmolL。
‘柒’ 如何准备0.1 mM ABA ABA母液
去试剂公司买标样,注意温度和避光。回来后在冰浴避光的条件下配好浓度。一定要注意温度和光度,前两天我毕前配ABA母液时,忘记放冰箱保存了,结果滚清经手备清过一晚上就变质了~
‘捌’ MS培养基一共有几种母液分别什么组分,如何配置
培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。
这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液。现将制运此宽备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。大量元素(母液Ⅰ) mg/LNH4NO333 000KNO338 000CaCl2·2H2O8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ)KI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇20 000ⅣB烟酸100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 20甘氨酸 400以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,扒芦并将pH调至5.5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。MS培养基中还需要加入:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6-苄基嘌呤(6-BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0?1 mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6-BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。配制培养液 用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量:母液Ⅰ为50 mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2,4-D 5 mL、NAA 1 mL,与各种母液一旁亮起放入烧杯中。
‘玖’ 母液的配置
母液和储存液差不多,都是高浓度的培养液。在使用的时候按照比例稀释就能使用了。这样做的好处是使用方便,防止反复冻融对成份产生不良影响。
比如我们要配制LB培养液,如果这次需要配100ml,我们要把几种成份一个一个称量好,定容至100ml。明天又要用100mlLB,我们还要称量好几次。这样很麻烦。不如我们这样做:配制一瓶100倍浓度的LB母液,用100ml的时候,就取1ml母液,定容到100ml。这个100ml直接能用来培养的就是工作液。母液平时保存在低温下,因为浓度高所以不怎么占地方。所以又叫储存液。
LB只是举个例子,事实上我们实验室很少把LB作为母液储存的。