⑴ 台盼蓝染色实验步骤
用品: 1. 4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。 2. 吸管、血细胞计数板、显微镜。
⑵ 细胞培养用PBS缓冲溶液如何配制
建议你最好买现成的粉末,GIBCO或者SIGMA是最好的,当然也是最贵的.水用四蒸就可以了,配好之后直接高压灭菌后就可以用了,很方便.要是不放心加点抗生素也行.如果有条件的话也可以直接买液体的,不过需要的银子就更多了.三磷酸腺苷(站内联系TA)国产的粉末就可以
PBS这个东西太简单了,国产货不会有意外的chuyinghao(站内联系TA)自己配都行啊,今天我还看有人卖生工的20*的PBS呢gulili2008(站内联系TA)PBS溶液:NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4?H2O 1.56g,KH2PO4 0.20g,
加去离子水至1000ml,调PH值至7.2laimin15(站内联系TA)准备十个1OOML的小瓶,1L的容量瓶,泡酸处理,买成包PBS,一般一包配一升.用容量瓶配完后分装到十个小瓶中,用塞子塞紧.然后每个塞子上插好针头.放到高压蒸气锅内灭菌.laimin15(站内联系TA)对了,用三蒸水配奥running8853(站内联系TA)PBS”缓冲液
PH 7.6 7.4 7.2 7.0
H2ONaClNa2HPO4NaH2PO4 1000
8.5
2.2
0.1 1000
8.5
2.2
0.2 1000
8.5
2.2
0.3 100ml
8.5g
2.2g
⑶ 台盼蓝染液是干什么的
台盼蓝染液可以检测细胞膜的完整性,检测细胞是否存活。台盼蓝,是哪源辩一种有机化合物,化学式为C34H24N6Na4O14S4,常用作细胞活性染料。
台盼蓝,一种偶氮、亲水裂基性酸性蓝色染料,可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜,将其染成蓝色,而活细胞由于其细胞膜的完整性,可将台盼蓝排李缺斥在外,因此,通过颜色的变化,即可将活细胞和死细胞鉴别开来,基于此原理,本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。
台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外,台盼蓝还常用来淬灭细胞表面的自荧光,或者其他荧光信号。
台盼蓝母液配置方法:
1、制备4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100mL,用滤纸过滤,4℃保存。使用时。用PBS稀释至0点4%。
2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。
3、染色:细胞悬液与0点4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
4、计数:在三分钟内,分别计数活细胞和死细胞。
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%。