1. 结合碱裂解法提取质粒，配置溶液1为什么使用ph酸度计
若无特殊考虑，Rnase加入到Buffer 1，并低温保存是最好的。在最终收获的质粒中加入，会带来RNAase的污染，并会有寡核苷酸的带入，并可能降低你质粒的得率，你需要考虑是否对你后续实验有影响（是否还要去RNAase？）。
另一种情况，就是你忘记王Buffer1中提前加入RNAase，这时，干脆就别加了，反正质粒都提完了，何必又带来RNAase的污染？RNA不甚稳定，一般在破细胞时，大多会降解的。
想保持质粒完整，那就是在分别加Buffer2、buffer3时，避免剧烈混合，温柔混合。这是关键！
个人见解，供您参考，祝愉快！
2. WB实验时，细胞裂解液如何配置
组织裂解液（全细胞蛋提取）：
1：Tris-HCL 50mmoL/L PH 7.4
2: Nacl 150 mmoL/L
3: 去氧胆酸钠 0.25%
4：NP-40或Triton-x-100 1%
5: EDTA 1 mmoL/L
6： PMSF 1 mmoL/L
7： Aprotinin 1μg/ml
8: leupeptin 1μg/ml
9: pepstain 1μg/ml
其中:7,8,9作用不持久，要使用前加入。
细胞裂解液：1：NP-40裂解体系：150 mmoL/L Nacl
1.0%NP-40或Triton-x-100
50 mmoL/L Tris(PH8.0)
2：RIPA裂解体系：150 mmoL/L Nacl
1.0%NP-40或Triton-x-100
0.5%脱氧胆酸钠
0.1%SDS
50 mmoL/L Tris( ph8.0)
3. 细胞裂解液配方
含 CTAB 的裂解液，主要用于富含多糖的样品，如细菌、植物。
4. 配置裂解液.SDS sodium deoxycholate怎么加
1%SDS，0.2MNaOH，这是碱裂解法提质粒的裂解细菌的方法不同的细菌不一样的这主要是针对大肠杆菌
5. 溶菌酶溶液怎么配置，用于细胞的裂解
0.1g溶菌酶溶解到10ml 10mmol/L Tris•Cl(pH8.0)，分装成1ml/小份，保存于-20℃。
溶菌酶（lysozyme）又称胞壁质酶（muramidase）或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶（N-acetylmuramide glycanohydrlase），是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。因此，该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。
6. 请教用溶菌酶裂解细菌的配方
溶菌酶( lysozyme )主要是由吞噬细胞合成并分泌的一种小分子粘性蛋白，属乙酰多糖酶。存在于唾液、乳汁、泪液和鼻及气管等分泌物中，能溶解革兰氏阳性细菌。由于它的高等电点( pH11.0 )，使它能与细菌牢固结合，并水解细菌细胞壁肽聚糖，使细菌裂解死亡。 本实验在平板上进行唾液…
溶菌酶( lysozyme )主要是由吞噬细胞合成并分泌的一种小分子粘性蛋白，属乙酰多糖酶。存在于唾液、乳汁、泪液和鼻及气管等分泌物中，能溶解革兰氏阳性细菌。由于它的高等电点( pH11.0 )，使它能与细菌牢固结合，并水解细菌细胞壁肽聚糖，使细菌裂解死亡。
本实验在平板上进行唾液酶的测定。溶菌酶与枯草芽胞杆菌( Bacillus subtilis )作用后，可使该菌因细胞壁破坏而溶解，致使琼脂板加样孔周围出现溶菌环。溶菌环直径与样品中溶菌酶含量的对数呈直线关系。
【材料】
1• 无菌 PBS ( pH6.4 ， 1/15mol/L )， 5mol/LKOH ， 3%PBS 琼脂，溶菌酶标准品，受验者唾液。
2• 枯草芽胞杆菌 12 小时培养物。
3• 10×100 试管，试管架，无菌平皿，打孔器，微量加样器。
4• 分光光度计，水浴箱，温箱等。
【方法】
1. 菌液配制：将 PBS 加入枯草芽胞杆菌斜面，置室温 5-10 分钟后制成菌悬液；在波长 640nm 处，测定菌悬液的浓度，并将菌液浓度调至透光率 30-40% 。
2. 溶菌酶标准液配制：称取溶菌酶标准品，用 PBS 配成 1000 m g/ml ，置冰箱冻存，临用时再稀释成 100 、 50 、 25 和 10 m g/ml 。
3. 收集唾液标本：待检测者用清水漱口后，将唾液收集于消毒平皿内待用。
4. 加热融化 3% 琼脂，冷至 60 -70℃ ，与预热好的枯草芽胞杆菌菌悬液等体积混合，到平板。用打孔器在平板上打孔，孔间距约 1.5cm , 每平板可打孔 8-9 个。
5. 各孔内依次加溶菌酶标准品和唾液样品，每孔 20 m l 。
6. 置于 24 -26 ℃ 12-18 小时后测量溶菌环直径。
【结果判断】
记录溶菌环的直径( mm )于下表，绘制标准曲线，并从标准曲线上查出所测样品的溶菌酶含量。
7. DNA中结合液cb结合了什么成分
DNA中结合液cb结合了什么成分
1、不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤.
2、 快速,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成.
3、多次柱漂洗确保高纯度,典型的产量200µl全血可提取出3-6µg,OD260/OD280典型的比值达1.1.9,长度可达30 kb -50kb,可直接用于PCR、Southern-blot和各种酶切反应.
4、从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方,裂解快速完全,客户可根据需要选择购买.
典型的产量200µl全血可提取出3-6µg 基因组DNA.
5、洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应.也可以使用水洗脱,但应该确保批pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率.用水洗脱DNA应该保存在－20℃.DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0）,但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释.
8. NP40细胞裂解液怎么配制
组织裂解液配方：`
7M Urea(60. 06) 4.2042 g
2M thiourea(76.12) 1.5224 g
100mM DTT 0.1543 g
4% CHAPS 0.4 g
0.5mM EDTA 0.00146 g
40Mm Tris 0.0485 g
2%(v/v) NP-40 0.2 ml
1%(v/v) Triton X-100 0.1 ml
5mM PMSF用前加 0.00871 g
2%pharmalyte 0.2ml
共10ml分装成400µl/每管（可应用于30-80毫克组织裂解）
注：已配好分装成400µl/每管可供应用
不需另配！！！
细胞裂解液配方：
6M Urea(60. 06) 1.8018 g
2M thiourea(76.12) 0. 7613 g
65mM DTT 0.050 g
4% CHAPS 0.2 g
40Mm Trisbase 0.02425 g
共5ml分装成200µl/每管（可应用于50-100ml培养瓶内的细胞裂解）
细胞裂解液： 组织裂解液配方：
7 mol/L 尿素、 7M Urea(60. 06) 4.2042 g
2 mol/L硫脲、 2M thiourea(76.12) 1.5224 g
2% NP-40、 2%(v/v) NP-40 0.2 ml
1% Triton X-100、 1%(v/v) Triton X-100 0.1 ml
65 mmol/L DTT、 0.1003g 100mM DTT 0.1543 g
5 mmol/L PMSF、 5mM PMSF用前加 0.00871 g
4% CHAPS、 4% CHAPS 0.4 g
40 mmol/L Tris、 40Mm Tris 0.0485 g
2% pharmalyte（pH3-10）、2%pharmalyte 0.2ml
0.5mM EDTA 0.00146 g
25 mg/L DNase I、
7 mg/L RNase A、
20 mg/L aprotinin、
20 mg/L leupeptin、
2 mmol/L Na3VO4、
Phosphatase Inhibitor Cocktail 1
Phosphatase Inhibitor Cocktail 2
1ml水化液配方：
8M Urea(60.06) 0.48048 g
2% CHAPS 0.02 g
痕量溴酚兰 0.4 µl
1%的痕量溴酚兰（10mg+1000µl双蒸水）
450µl水化液 加DTT 0.00135mg
or 400µl水化液 加DTT 0.00126mg
9. 磁珠法提取血浆DNA时，裂解液，结合液，洗脱液分别指什么
裂解液是：盐酸胍
结合液是：生物磁珠
洗脱液是：蒸馏水