‘壹’ 用50%的戊二醛溶液如何配制4%戊二醛溶液(扫描电镜用)
1.
将50%的戊二醛溶液X毫升加入适量的溶剂配制4%戊二醛溶液。
100:50=X:4
50X=100X4
X=400/50
X=8
2.
取50%原溶液8毫升加溶剂到100毫升就配制成了4%戊二醛溶液。
3.
戊二醛,
分子式为C5H8O2,带有刺激性气味的无色透明油状液体,溶于热水。对眼睛、皮肤和粘膜有强烈的刺激作用。可作为食品工业加工助剂,菌消毒剂、鞣革剂、木材防腐剂,药物和高分子合成原料等。
‘贰’ 透射电镜试样如何制备
一.取材:组织块小于1立方毫米
二.固定:2.5%戊二醛,磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次
1%锇酸固定液固定2-3小时
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次
三.脱水:50%乙醇15-20分
70%乙醇15-20分
90%乙醇15-20分
90%乙醇 90%丙酮(1:1)15-20分
90%丙酮15-20分
以上在4度冰箱内进行
100%丙酮室温15-20分三次
四.包埋:纯丙酮+包埋液(2:1)室温 3-4小时
纯丙酮+包埋液(1:2)室温 过夜
纯包埋液 37度 2-3小时
五.固化:37度烘箱内 过夜
45度烘箱内 12小时
60度烘箱内 24小时
六.LKB-1型超薄切片机切片 50-60 nm
七.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色
八.日本电子JEM-1200EX透射电镜观察。拍片
‘叁’ 甲醇和冰乙酸3:1配置固定液作用的原理为什么现用现配
1、在实验中使用两种混和的固定液。由于Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而称的卡诺氏固定液是效果良好的固定液。
Carnoy固定液(甲醇:冰乙酸=3:l)每次使用前需临时配制,长时间放置影响固定效果,固定时间15分钟至24小时,冰箱、室温均可。
必要时可改变甲醇和冰乙酸的比例,冰乙酸比例增加,利于细胞膨胀、染色体铺展,但易导致细胞破裂、染色体散失。
2、甲醇与冰醋酸(乙酸)能反应生成乙酸甲酯,所以要现配现用
(3)电镜固定液怎么配置扩展阅读:
1、卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid/carnoys fixative)适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖、花药压片及子房石蜡切片等,有极快的渗透力。
有极快的渗透力,根尖材料固定15—20min即可,花药则需1h左右,此液固定最多不超过24h,固定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止;
2、如果材料不马上用,需转入70%酒精中保存。固定液的重要特性是能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,还要能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。
3、乙酸可用作酸度调节剂、酸化剂、腌渍剂、增味剂、香料等。它也是很好的抗微生物剂,这主要归因于其可使pH降低至低于微生物最适生长所需的pH。
4、甲醇可用作分析试剂,如作溶剂、甲基化试剂、色谱分析试剂。还用于有机合成。
‘肆’ 透射电镜灌注固定戊二醛用多大浓度
透射电镜物品制备步骤
物品, 透射电镜, 制备步骤
.取材:
组织块于1立毫米
二.固定:
2.5%戊二醛磷酸缓冲液配制固定2或更间
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三
1%锇酸固定液固定 2-3
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三
三.脱水:
50%乙醇 15-20
70%乙醇 15-20
90%乙醇 15-20
90%乙醇 90%丙酮(1:1) 15-20
90%丙酮 15-20
4度冰箱内进行
100%丙酮 室温 15-20三
四.包埋:
纯丙酮+包埋液(2:1)室温 3-4
纯丙酮+包埋液(1:2)室温 夜
纯包埋液 37度 2-3
五.固化:
37度烘箱内 夜
45度烘箱内 12
60度烘箱内 24
六.超薄切片机切片 50-60 nm
七.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色
八.透射电镜观察拍片
由于物品含水太电镜真空蒸发掉破坏结构所需要些能够水温取代掉、并且自身没结构物质树脂包埋剂物脆弱、结构容易破坏所才需要温制才复杂物电镜制主要工作看电镜倒要物品超薄切片流程图:
‘伍’ 肌肉做电镜扫描,请问样品的形状大小有要求吗,用什么固定液,需要换液吗,谢谢啦。
2.5%电镜专用戊二醛固定液固定后,尽快送电镜室。
‘陆’ 电镜用的固定液可以存放多长时间
透射电镜物品制备步骤物品,透射电镜,制备步骤.取材:组织块于1立毫米二.固定:2.5%戊二醛磷酸缓冲液配制固定2或更间用0.1M磷酸漂洗液漂洗15三1%锇酸固定液固定2-3用0.1M磷酸漂洗液漂洗15三三.脱水:50%乙醇15-2070%乙醇15-2090%乙醇15-2090%乙醇90%丙酮(1:1)15-2090%丙酮15-204度冰箱内进行100%丙酮室温15-20三四.包埋:纯丙酮+包埋液(2:1)室温3-4纯丙酮+包埋液(1:2)室温夜纯包埋液37度2-3五.固化:37度烘箱内夜45度烘箱内1260度烘箱内24六.超薄切片机切片50-60nm七.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色八.透射电镜观察拍片由于物品含水太电镜真空蒸发掉破坏结构所需要些能够水温取代掉、并且自身没结构物质树脂包埋剂物脆弱、结构容易破坏所才需要温制才复杂物电镜制主要工作看电镜倒要物品超薄切片流程图:
‘柒’ 求助:电镜标本怎么固定
在透射电镜的样品制备方法中,超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术。超薄如果组织带有较多的血液和组织液,应先用固定液洗几遍,然后再切成小块固定
‘捌’ FAA固定液配置方法
FAA固定液配制方法:
配方:福尔马林(38%甲醛)、5ml冰醋酸、5ml70%、酒精90ml、5ml甘油(丙三醇)。
将上述液体混合即可。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
FAA固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液或AAF、AAF固定液,主要由乙醇(A)、乙酸(A)、甲醛(F)组成,兼有脱水作用。AAF固定液常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。
(8)电镜固定液怎么配置扩展阅读:
FAA固定液注意事项:
1、AAF固定液对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。
2、固定液pH最好接近用中性,pH范围6~8。
3、组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。常规活
检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。
4、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
‘玖’ 透射电镜样品制备方法是什么
透射电镜试样制备:
一、实验内容及目的:了解透射电镜对试样的要求,熟悉透射电镜试样的制备过程,制备一个合格的透射 电镜试样。
二、薄膜样品的制备:用于透射电镜下观察的试样厚度要求在50-200nm 之间,对于不导电的陶瓷材料和脆性材料,最终减薄可采用离子减薄法。
该法是用离子束在样品的两侧以一定的倾角(5-30)轰击样品,使之减薄。由于陶瓷样品硬度高,耐腐蚀,因此,离子减薄的时间长。对于要求较高的金属薄膜样品,在双喷后再进行一次离子减薄,效果会更好。
预减薄
预减薄的目的在于使圆片的中心区域进一步减薄,以确保最终在圆片的中心部位穿孔(其边缘附近区域可供观察),预减薄通常采用专用的机械研磨机,使中心区域减薄至约10μm厚,借助于微处理器控制的精密研磨有时可以获得使电子束透明的厚度(<1μm).有时也用化学方法进行预减薄。
以上内容参考:网络-样品制备
‘拾’ 做电镜固定,25%戊二醛怎么稀释到2.5
做电镜固定,25%戊二醛怎么稀释到2.5
透射电镜物品制备步骤
物品, 透射电镜, 制备步骤
.取材:
组织块于1立毫米
二.固定:
2.5%戊二醛磷酸缓冲液配制固定2或更间
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三
1%锇酸固定液固定 2-3
用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三
三.脱水:
50%乙醇 15-20
70%乙醇 15-20
90%乙醇 15-20
90%乙醇 90%丙酮(1:1) 15-20
90%丙酮 15-20
4度冰箱内进行
100%丙酮 室温 15-20三
四.包埋:
纯丙酮+包埋液(2:1)室温 3-4
纯丙酮+包埋液(1:2)室温 夜
纯包埋液 37度 2-3
五.固化:
37度烘箱内 夜
45度烘箱内 12
60度烘箱内 24
六.超薄切片机切片 50-60 nm
七.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色
八.透射电镜观察拍片
由于物品含水太电镜真空蒸发掉破坏结构所需要些能够水温取代掉、并且自身没结构物质树脂包埋剂物脆弱、结构容易破坏所才需要温制才复杂物电镜制主要工作看电镜倒要物品超薄切片流程图: